[發明專利]微流體分析設備

在審

• 申請號: 202111216475.0
• 申請日: 2018-06-21
• 公開（公告）號: CN113967488A
• 公開（公告）日: 2022-01-25
• 發明（設計）人: 托馬斯·亨利·艾薩克;佩德羅·昆哈;艾厄因·謝里丹;大衛·拉烏;麗貝卡·帕爾莫;道格拉斯·J·凱利;加雷斯·鮑德
• 申請（專利權）人: 光投發現有限公司
• 主分類號: B01L3/00
• 分類號: B01L3/00;C12Q1/6869
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 文潔

一種通過光學介導的電潤濕(oEWOD)在微流體基片上同時操控數千個微滴的方法。所述方法包括：快速地創建高度復雜的暫時電潤濕位置的圖案以便使用被緊密控制的電潤濕力來精確地導控微滴；其中所述暫時電潤濕位置的圖案包括多個相伴延伸的第一電潤濕路徑；其中所述暫時電潤濕位置的圖案包括多個第三電潤濕路徑，所述第三電潤濕路徑與第一電潤濕路徑相交以產生至少一個微滴匯聚位置；利用第二電磁輻射詢檢在所述位置上的微滴并且檢測由每個微滴發射的任何熒光或拉曼散射。

本申請是2019年12月20日進入中國的PCT專利申請PCT/EP2018 /066574，國家申請號為201880041800.4，發明名稱為“微流體分析 設備”的專利申請的分案申請。

技術領域

本發明涉及一種研究核酸分子(nucleic acid molecule)的設備； 特別是用于對天然或合成來源的DNA或RNA進行測序的設備。

背景技術

在我們之前的申請WO 2014/053853、WO 2014/053854、WO2014 /167323、WO2014/167324和WO2014/111723中，我們已經描述 了一種新的測序方法，該方法涉及逐步消化多核苷酸分析物 (polynucleotide analyte)以產生有序的單核苷酸的流(stream)，優 選地，單核苷三磷酸(single nucleoside triphosphates)流，它們的每 一個可以被一個一個地捕獲到微滴流中的相應微滴中。此后，可以對 每個液滴進行化學和/或酶促(enzymatically)處理以揭示其最初包含 的特定單核苷酸。在一個實施方案中，這些化學和/或酶促處理包括 一種涉及使用一種或多種二組分寡核苷酸探針類型(two-componentoligonucleotide probe types)的方法，每種類型被適配為能夠選擇性 地捕獲構成分析物的單核苷酸類型之一。通常，在這樣的探針類型中 的每種中，兩個寡核苷酸組分中的一個包含特征性熒光團 (fluorophores)，并且在探針未使用的狀態下，這些熒光團發出熒光的能力由于存在于附近的淬滅劑(quenchers)或通過自身淬滅 (self-quenching)而消失。在使用中，當探針已捕獲了其相應的單核 苷酸，其變得易感于隨后的核酸外切(exonucleolysis)或核酸內切(endonucleolysis)，從而使熒光團從淬滅劑中釋放和/或從彼此釋放， 從而使它們能夠自由地發出熒光。通過這種方式，可以通過光譜學手 段間接地推斷出存在于每個液滴中的原始單核苷酸。

在設計測序設備時，需要操縱數千個微滴，以確保例如它們被可 靠地遞送到位，在微滴被遞送到的位置，它們可以與其他合并和/或 它們的內含物依據是否存在熒光而被分析。

這樣做的一種可能的方式是在基底上建立路徑，通過電潤濕力可 以沿著該路徑推動微滴。用于以這種方式操控相對大的液滴的設備先 前已經在本領域中被描述了；參見例如US6565727、US20130233425 和US20150027889。通常，這是通過使液滴，例如在不溶混的 (immiscible)載體流的存在下，穿過微流體通道來實現的，所述微 流體通道由盒體(cartridge)的兩個相對的壁限定或由管道限定。嵌 在盒體壁或管道壁中的是覆蓋有介電層的電極，每個電極都連接到A /C偏置電路，該電路可以間歇地快速打開和關閉，以修改所述層的 電潤濕特性(electrowetting characteristics)。這引起局部化的方向性 毛細作用力，該作用力可用于沿著給定的路徑導控液滴。