[發(fā)明專利]一種高產(chǎn)洛伐他汀紅曲及其培育方法和應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111172955.1
• 申請日: 2021-10-08
• 公開（公告）號: CN113881572A
• 公開（公告）日: 2022-01-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 馮霞;張蓓蓓;劉義;陳麒名;李峰;朱英
• 申請（專利權(quán)）人: 四川省食品發(fā)酵工業(yè)研究設(shè)計院有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P17/06;C12R1/645
• 代理公司: 西安正華恒遠知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 61271
• 代理人: 傅曉

本發(fā)明公開了一種高產(chǎn)洛伐他汀紅曲及其培育方法和應用。其培育方法為：(1)菌種活化；(2)制備一級種子液；(3)制備二級種子液；(4)發(fā)酵基質(zhì)預處理；(5)接種培養(yǎng)。本發(fā)明培育方法能夠培育得到高產(chǎn)洛伐他汀的紅曲，并且，在高產(chǎn)洛伐他汀的同時，還不會發(fā)酵產(chǎn)生桔霉素和黃曲霉毒素B₁。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于紅曲培育技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種高產(chǎn)洛伐他汀紅曲及其培育方法和應用。

背景技術(shù)

紅曲米又名紅曲、赤曲、紅米或福米，呈棕紅色至暗紅色，它以秈稻、粳稻和糯米等為原料，用紅曲霉菌發(fā)酵而成。在中國及東南亞，紅曲被廣泛應用作食品著色劑、發(fā)酵劑、中藥。

洛伐他汀是紅曲霉培養(yǎng)物中具有生理活性功能的產(chǎn)物之一，由于其是膽固醇合成限制酶3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶的抑制劑，可以抑制生物體內(nèi)膽固醇的合成，所以近年來洛伐他汀類藥物的開發(fā)一直是人們研究功能性紅曲的熱點。桔霉素是一種真菌毒素，具有腎肝毒性。在紅曲霉發(fā)酵晚期，易產(chǎn)生次級代謝產(chǎn)物桔霉素，而且還發(fā)現(xiàn)有致畸作用，但并非所有的紅曲菌都會產(chǎn)生桔霉素，日本用叢毛紅曲霉，紅色紅曲霉，單色紅曲霉生產(chǎn)出不含桔霉素的產(chǎn)品，而且桔霉素的產(chǎn)生與否與生產(chǎn)方法有關(guān)，生產(chǎn)工藝條件還決定桔霉素的含量，例如許贛榮等篩選得到數(shù)株低產(chǎn)桔霉素的紅曲菌種。

目前，紅曲的生產(chǎn)多數(shù)是以傳統(tǒng)的開放式或半開放式固態(tài)發(fā)酵法，其生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生條件差、種子純度低、極易感染雜菌、生產(chǎn)條件不易控制、成品紅曲質(zhì)量參差不齊。大多企業(yè)采用液固聯(lián)合制曲法生產(chǎn)紅曲，也存在很多問題，如菌種性能不佳、桔霉素超標、低溫發(fā)酵能耗高等。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)中的上述不足，本發(fā)明提供一種高產(chǎn)洛伐他汀紅曲及其培育方法和應用，可制備得到高產(chǎn)洛伐他汀的紅曲。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：

一種高產(chǎn)洛伐他汀紅曲的培育方法，包括以下步驟：

(1)菌種活化

將冷藏的菌株接種至固體培養(yǎng)基，于25～30℃培養(yǎng)5～7天；

(2)制備一級種子液

洗脫活化后的菌種孢子，然后接種至培養(yǎng)基中，于25～30℃、100～200rpm/min振蕩培養(yǎng)20～30h，制備得到一級種子液；

(3)制備二級種子液

將一級種子液接種至培養(yǎng)基中，于25～30℃、100～200rpm/min振蕩培養(yǎng)40～50h，制備得到二級種子液；

(4)發(fā)酵基質(zhì)預處理

控制清洗后的大米的水分含量為10～20％，然后加入營養(yǎng)液，于0.1～0.5mpa、100～150℃滅菌10～20min后，冷卻至40～50℃，備用；

(5)接種培養(yǎng)

將二級種子液接種至發(fā)酵基質(zhì)，于25～30℃，濕度65～70％的條件下發(fā)酵培養(yǎng)即可。

進一步地，步驟(1)中所述菌株的接種量為1～10％。

進一步地，菌株的接種量為5％。

進一步地，步驟(2)中所述菌種孢子的接種量為1～10％。

進一步地，菌種孢子的接種量為5％。

進一步地，步驟(3)中所述一級種子液的接種量為1～10％。

進一步地，一級種子液的接種量為10％。

進一步地，步驟(4)中所述營養(yǎng)液包括重量百分比的以下組分：

2～5％葡萄糖、0.1～0.5％硝酸鈉、0.1～0.5％硫酸鎂，余量為水。