[發明專利]末梢血中10種元素電感耦合等離子體質譜檢測

有效

• 申請號: 202111167111.8
• 申請日: 2021-10-02
• 公開（公告）號: CN113984872B
• 公開（公告）日: 2023-09-12
• 發明（設計）人: 倪鑫;宋文琪;朱柯文;馬慶偉;呂倩;金芳;苗旭東;錢婧雨;張成芳;李啟亮;張宇杰;王艷;袁紅
• 申請（專利權）人: 北京毅新博創生物科技有限公司;首都醫科大學附屬北京兒童醫院
• 主分類號: G01N27/626
• 分類號: G01N27/626
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種ICP-MS檢測末梢血10種微量元素的方法，所述方法包括步驟：

(1)樣本采集：使用75％乙醇或異丙醇進行皮膚表面消毒，采用觸壓式末梢采血器進行采血，采用一次性微量采血管取血，并采用玻璃毛細管乳膠吸頭對采集末梢血進行定量轉移，其中所述微量采血管為100μL的微量采血管；

(2)樣本待測液制備：按(1)的方法取80μL末梢血樣本與1.9mL樣本稀釋液在2.5mL的離心管中進行混合，然后置于旋渦震蕩混勻器上混勻30秒，其中所述的樣本稀釋液是含有0.1％(v/v)曲拉通溶液、0.1％(v/v)HNO₃和2％(v/v)異丙醇的混合溶液，余量為純凈水；

(3)空白樣本制備：取裝有1.9mL樣本稀釋液的2.5mL離心管，不向其中加入任何溶液，然后置于旋渦震蕩混勻器上混勻30秒；

(4)質控檢測液制備：按(1)的方法取復溶后的全血無機元素質控品與1.9mL樣本稀釋液在2.5mL的離心管中進行混合，然后置于旋渦震蕩混勻器上混勻30秒，其中所述全血無機元素質控品是全血無機元素質控品含有肝素抗凝牛全血和國家標準標準溶液的混合固態質控品，其有高、中、低三個濃度，其各元素的濃度見下所示：

(5)樣本待測液存儲：稀釋后的樣本置于2-8℃冰箱內保存，存儲時間≤72小時上機檢測；

(6)配置相應濃度待測元素校準曲線的外標校準品和校準儀器漂移的內標校準品，其中所述的內標校準品是2％硝酸配制的含有鍺Ge、釔Y、銦In、鋱Tb元素的混合溶液，各元素濃度均為40μg/L；

(7)上機檢測：

依次將空白樣本、外標校準品0-5、質控檢測液、樣品待測液引入儀器進行測定，在線加入內標校準品，其中樣品溶液和內標液以1:1進樣；以外標校準品中待測元素信號和內標校準品中元素信號的比值為Y軸，外標校準品中待測元素的濃度為X軸，繪制校準曲線y＝ax+b，當各元素校準曲線的相關系數r²0.999以上時，方可進行質控檢測液的檢測；當質控檢測液檢測結果的誤差在95％置信區間以內，方可繼續檢測樣品待測液；

其中，所述的外標校準品是用2％硝酸配制的含有Mg、Ca、Mn、Fe、Cu、Zn、As、Se、Cd、Pb元素的混合的6種濃度梯度溶液，其各元素的梯度濃度如下所示：

(8)結果處理

軟件自動根據(7)中回歸方程計算出樣本待測液中各待測元素含量的質量濃度(μg/L)，末梢血樣本中微量元素濃度的計算為：

ρ_(X)＝(C_X-C₀)×K…………………………(1)

式中：

ρ_(X)—末梢血樣本中微量元素的質量濃度，單位為微克每升(μg/L)；

C_X—由標準曲線查得的樣本待測液中微量元素的質量濃度，單位為微克每升(μg/L)；

C₀—由標準曲線查得的空白樣本中微量元素的質量濃度，單位為微克每升(μg/L)；

K—全血稀釋倍數；

V_X—末梢血的取血量，單位為毫升(mL)。

2.權利要求1所述的方法，其中所述步驟(2)所述步驟(2)中末梢血中鎂、鈣、銅、硒、鉛、鎘最小采血量為60μL，鋅、鐵、錳和砷的最小采血量為80μL，故80μL為最小采血量。

3.權利要求1或2所述的方法，其中所述步驟(2)以質控品標示值或100μL結果為靶值，鎂、錳、銅、硒、鋅5種元素按照1/2室間質評允許總誤差確定＜12.5％；鐵元素按照1/2室間質評允許總誤差確定＜10％，鈣元素按照1/2室間質評允許總誤差確定靶值±0.125，鉛元素按照1/4室間質評允許總誤差確定靶值±10，滿足上述標準時，認定該取樣量可作為最小取樣量。

4.權利要求1或2所述的方法，其中所述步驟(5)中對全血中鈣，鎂，錳，鐵，銅，鋅，硒，砷，鎘和鉛樣本存儲時間最長為72小時。