[發明專利]一種促進乳源假單胞菌分泌胞外蛋白酶的方法

在審

• 申請號: 202111131230.8
• 申請日: 2021-09-26
• 公開（公告）號: CN113621597A
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 韓雪;王宇;張蘭威;易華西;孫嘉蕾;陳曦;王淑梅
• 申請（專利權）人: 哈爾濱工業大學
• 主分類號: C12N9/52
• 分類號: C12N9/52;C12N1/20;C12N1/38;C12R1/38;C12R1/39;C12R1/385;C12R1/40
• 代理公司: 哈爾濱龍科專利代理有限公司 23206
• 代理人: 李智慧

1.一種促進乳源假單胞菌分泌胞外蛋白酶的方法，其特征在于所述方法包括如下步驟：

步驟一、將乳源添加劑加入到培養基中進行均質處理，然后滅菌；

步驟二、將具有分泌蛋白酶AprX的乳源嗜冷假單胞菌按照0.5～1.5％(v/v)的接種量接種到培養基中活化2～4次，將活化好的乳源嗜冷假單胞菌接種到添加乳源添加劑的培養基中進行培養。

2.根據權利要求1所述的促進乳源假單胞菌分泌胞外蛋白酶的方法，其特征在于所述均質壓力為10～20MPa，均質時間為15～25min。

3.根據權利要求1所述的促進乳源假單胞菌分泌胞外蛋白酶的方法，其特征在于所述滅菌溫度為121℃，時間為10～25min。

4.根據權利要求1所述的促進乳源假單胞菌分泌胞外蛋白酶的方法，其特征在于所述培養基為TSB培養基。

5.根據權利要求1所述的促進乳源假單胞菌分泌胞外蛋白酶的方法，其特征在于所述乳源添加劑為牛乳酪蛋白、牛乳清蛋白、乳糖或天然黃油中的一種或多種混合物，添加量為0.5～5％(w/v)。

6.根據權利要求5所述的促進乳源假單胞菌分泌胞外蛋白酶的方法，其特征在于所述牛乳酪蛋白的α-酪蛋白含量在20～40％，牛乳清蛋白的純度為75～90％，天然黃油的含鹽量為0～20mg/100g。

7.根據權利要求1所述的促進乳源假單胞菌分泌胞外蛋白酶的方法，其特征在于所述乳源嗜冷假單胞菌為從原料乳中分離的具有分泌蛋白酶AprX的嗜冷假單胞菌。

8.根據權利要求7所述的促進乳源假單胞菌分泌胞外蛋白酶的方法，其特征在于所述嗜冷假單胞菌為熒光假單胞菌、惡臭假單胞菌或銅綠假單胞菌。

9.根據權利要求1所述的促進乳源假單胞菌分泌胞外蛋白酶的方法，其特征在于所述培養溫度為25～35℃，培養時間為60～70h，攪拌速度為150～200rpm。