[發明專利]一種分子檢測試劑的凍干保護劑及應用

在審

• 申請號: 202111125384.6
• 申請日: 2021-09-23
• 公開（公告）號: CN113801926A
• 公開（公告）日: 2021-12-17
• 發明（設計）人: 溫云飛;余文博;萬慧婷;石煒菁;姜文彬;趙美青;馮莉;周玭
• 申請（專利權）人: 湖北海卓生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/686
• 分類號: C12Q1/686;F26B5/06
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 劉誠

1.一種分子檢測凍干保護劑，其特征在于，包括如下濃度的組分：海藻糖80～120mg/mL、蔗糖80～120mg/mL、甘露醇2～5wt％、右旋糖酐3～7mmol/L、聚乳酸-羥基乙酸共聚物0.5～6mg/mL、聚賴氨酸5～20mg/mL、吐溫-800.3～0.7wt％、二硫蘇糖醇0.05～0.25mg/mL。

2.根據權利要求1所述的凍干保護劑，其特征在于，所述組分為：海藻糖100mg/mL、蔗糖100mg/mL、甘露醇4wt％、右旋糖酐5mmol/L、聚乳酸-羥基乙酸共聚物4mg/mL、聚賴氨酸10mg/mL、吐溫-800.5wt％、二硫蘇糖醇0.15mg/mL。

3.根據權利要求1所述的凍干保護劑，其特征在于，還包括維生素組合5～20mg/mL，所述維生素組合包括維生素B、維生素C、維生素D及維生素K中的一種或多種。

4.一種分子檢測試劑，包括分子檢測體系，其特征在于，還包括權利要求1-2任意一項所述的分子檢測凍干保護劑。

5.根據權利要求4所述的分子檢測試劑，其特征在于，所述分子檢測體系包括熱啟動Taq酶、UNG酶及dNTP。

6.根據權利要求5所述的分子檢測試劑，其特征在于，所述分子檢測體系還包括反轉錄MMLV酶、引物、探針和緩沖液。

7.一種如權利要求4-6任意一項所述分子檢測試劑的凍干保護方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)取分子檢測體系和凍干保護劑，配制得到分子檢測試劑；

2)將分子檢測試劑置于-30～-20℃的溫度下進行預凍處理1～3h后，再以1.0～1.5℃/min的速率降至-50～-40℃冷凍1～3h；

3)將冷凍后的分子檢測試劑置于5～50Pa的真空環境下處理1～3h，再以0.3～0.8℃/min速率升至-40～-35℃保持4～7h后，再以0.3～0.8℃/min速率升至-30～-25℃保持3～5h，然后將PCR擴增試劑的溫度升至20～30℃，得到凍干處理后的PCR擴增試劑。

8.一種如權利要求7所述凍干保護方法制得的分子檢測試劑。

9.權利要求4-6、8中任意一項所述分子檢測試劑在熒光PCR檢測中的應用。