[發明專利]角膜接觸鏡淚蛋白含量測量方法及其應用

在審

• 申請號: 202111110787.3
• 申請日: 2021-09-18
• 公開（公告）號: CN115838391A
• 公開（公告）日: 2023-03-24
• 發明（設計）人: 丁夢瑤;孫碧霞
• 申請（專利權）人: 蘇州三個臭皮匠生物科技有限公司
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;G01N21/31;G01N33/68
• 代理公司: 蘇州簡理知識產權代理有限公司 32371
• 代理人: 楊瑞玲

本發明公開了一種角膜接觸鏡淚蛋白含量測量方法及其應用，該測量方法包括通過微量紫外分光光度計檢測角膜接觸鏡蛋白提取溶液中的蛋白濃度，具體包括：提供蛋白提取溶液，所述蛋白提取溶液包括8M鹽酸胍水溶液；將表面吸附有蛋白的角膜接觸鏡放置在蛋白提取溶液中，蛋白提取溶液將蛋白自所述角膜接觸鏡上分離，自蛋白提取溶液中取出角膜接觸鏡，通過微量紫外分光光度計檢測蛋白提取溶液中的蛋白濃度，得到鏡片吸附蛋白濃度值，通過鏡片吸附蛋白濃度值和蛋白提取液體積計算得到鏡片吸附蛋白含量值。通過本發明提供的方法可以定量檢測出鏡片吸附蛋白含量，為用戶提供實驗檢測數據，保障用戶消費使用安全。

技術領域

本發明涉及生物蛋白檢測領域，尤其涉及一種角膜接觸鏡淚蛋白含量測量方法及其應用。

背景技術

角膜接觸鏡如何除蛋白的問題困擾了行業半個多世紀，引發了各國的眼視光行業對接觸鏡佩戴安全的高度重視。我國也因角膜接觸鏡上的角膜感染案例頻發，從而將接觸鏡在2012年便列入第三類醫療器械類，作為高風險管理，其原因在于：接觸鏡材質結構有大量肉眼不見的纖維透氧孔，人眼時刻分泌大量的淚液，淚液里含有大量淚蛋白，淚蛋白極易滲透到纖維透氧孔中，造成鏡片DK值降低(透氧率)，造成角膜缺氧、水腫等癥狀，嚴重的會造成角膜受損，細菌感染，角膜炎癥甚至是視力受損等問題。

為了有效清除接觸鏡表面的淚蛋白，保障消費者的眼部安全，市場也推出了多種用于去除角膜接觸鏡表面淚蛋白的方法。但由于肉眼不可見淚蛋白是否被完全有效的洗脫降解，逐漸的蛋白檢測方法就被重視發展起來，以使得通過科學檢測有效驗證蛋白是否被完全降解。但是現階段市場上的角膜接觸鏡有效除蛋白的檢測方法因角膜接觸鏡內部縱橫交錯的透氧孔特殊結構具有局限性，無法找到一種可以直接有效且精確測量角膜接觸鏡所吸附淚蛋白的具體量值，因此其檢測結果不全面，僅具有一定的參考意義，其并不能成為定量定性檢測蛋白降解程度的專業檢測依據。

現階段行業內也暫未有直接測試角膜接觸鏡淚蛋白吸附量的方法，因此在對角膜接觸鏡的清洗效果的評判上還不夠準確，無法通過檢測結果給予用戶一個評測有效的清洗方案，也無法通過檢測結果對鏡片清洗方法的有效性做出評價，這一問題無疑阻礙了行業內在角膜接觸鏡清洗方法上的研究進展。

因此，亟需提出一種新的技術方案來解決上述問題。

發明內容

現階段市場上暫未有直接測試角膜接觸鏡淚蛋白吸附量的方法，因此在各種實驗中也無法對用戶使用過的角膜接觸鏡上淚蛋白的含量進行精確測量，更無法對清洗后的角膜接觸鏡進行安全性檢測，而未清洗干凈的鏡片上通常會附著有淚蛋白、微生物等對眼球不利的物質，尤其是附著在鏡片上的淚蛋白，其極易附著在鏡片內部縱橫交錯的透氧孔內。因此，在沒有有效清除鏡片淚蛋白的情況下佩戴鏡片，就必然存在眼球健康隱患。

本發明的目的是解決現有技術中存在的問題，提供一種有效測量角膜接觸鏡淚蛋白含量的方法，采用的技術方案如下：

一種有效測量角膜接觸鏡淚蛋白含量的方法，所述方法通過微量紫外分光光度計檢測角膜接觸鏡蛋白提取溶液中的蛋白濃度，具體包括：

提供蛋白提取溶液，所述蛋白提取溶液包括8M鹽酸胍水溶液；

將表面吸附有蛋白的角膜接觸鏡放置在所述蛋白提取溶液中，所述蛋白提取溶液將所述蛋白自所述角膜接觸鏡上分離，自所述蛋白提取溶液中取出所述角膜接觸鏡，通過所述微量紫外分光光度計檢測所述蛋白提取溶液中的蛋白濃度，得到鏡片吸附蛋白濃度值，通過所述鏡片吸附蛋白濃度值和蛋白提取液體積計算得到鏡片吸附蛋白含量值。

上述技術方案中進一步的，所述方法還包括：

制備所述表面吸附有蛋白的角膜接觸鏡：將待培養的角膜接觸鏡和蛋白培養液置于培養皿中密封培養，鏡片培養過程中，所述蛋白培養液中的一部分蛋白游離在所述蛋白培養液中，一部分蛋白沉淀在所述角膜接觸鏡上，剩余部分蛋白沉淀在所述培養皿內壁上。