[發明專利]一種用于動物源性食品中頭孢類藥物殘留量的檢測方法

有效

• 申請號: 202111055413.6
• 申請日: 2021-09-09
• 公開（公告）號: CN113791150B
• 公開（公告）日: 2023-08-11
• 發明（設計）人: 鐘世歡;葉佳明;葉磊海;楊娜;蘇敏;陳小麗;王京;秦蕓樺
• 申請（專利權）人: 浙江公正檢驗中心有限公司;贊宇科技集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/36;G01N30/72
• 代理公司: 杭州九洲專利事務所有限公司 33101
• 代理人: 王之懷;王洪新

本發明屬于食品安全檢測領域。技術方案是：一種用于動物源性產品中頭孢類藥物殘留的檢測方法，依照如下步驟進行：1)樣品預處理：稱取1?2g樣品于50mL離心管中，加入10mL乙二胺四乙酸(EDTA)?磷酸鹽緩沖溶液，50μL氯化膽堿鄰甲苯酚混合溶液、0.05?0.1g磁性石墨烯分子印跡聚合物，渦旋、超聲提取后，用磁力槍將磁性石墨烯分子印跡聚合物吸出；加入2mL?0.2％甲酸甲醇洗脫液將樣品中的頭孢類藥物殘留解析出來,氮氣吹干后用1.0mL水復溶、過0.22μm濾膜，獲得待測液；2)待測液的檢測：運用HPLC?MS/MS，在質譜ESI源下正離子模式下測定。該方法選擇性好、靈敏度高。

技術領域

本發明屬于食品安全檢測領域，尤其涉及一種動物源性食品中頭孢類藥物殘留的檢測方法。

背景技術

頭孢類藥物屬于廣譜抗生素，殺菌力強，然而過量使用頭孢類藥物會對人體健康帶來潛在的危害，對兒童、老人，特別是胎兒的影響更大，嚴重者會導致胎兒病變、畸形甚至死亡。且由于細菌產生耐藥性和過敏反應等原因，世界各國對部分動物源性產品中頭孢類藥物殘留量均提出了限量要求。現國家標準針對動物源性食品中頭孢類化合物檢測發布了一系列測定方法。但操作較為繁瑣，耗時較長，且對于同時測定這6種頭孢類藥物的檢測方法尚未建立。

分子印跡技術(molecularly?imprinted?technique,MIT)是制備對模板分子具有特異選擇性識別能力的聚合物-分子印跡聚合物的技術。該技術由于選擇性較強、穩定性好、易于制備而受到廣泛關注。石墨烯材料比表面積大及吸附能力優良，其原子以一種類似六角形蜂窩的形狀排列，特殊的結構可以和其他有機化合物形成較強的π-π共軛體系，使其具備極好的耐酸堿性能和化學穩定性。通過將石墨烯化學性質修飾，具有更廣泛的應用。若將石墨烯與磁性納米材料結合起來，使其強吸附性能和便捷的磁性分離相結合，形成一種新型的磁性石墨烯復合材料，最后在石墨烯磁性納米粒子表面合成分子印跡殼層。該磁性分子印跡聚合物不僅具有分子印跡的優勢，能夠特異性識別和吸附目標分子，而且能在磁場的作用下快速分離，同時由于石墨烯粒徑較小，具有較大的比表面積，吸附容量較大，在獸藥殘留檢測中有著廣泛的應用前景。

發明內容

本發明的目的是克服動物源性產品中頭孢類物質檢測復雜的前處理手段，提供一種簡便的頭孢類藥物殘留的檢測方法。該方法應具備選擇性好、靈敏度高、檢測時間短的特點，以提高檢測效率。

為實現上述目的，本發明提供了如下技術方案：

一種用于動物源性產品中頭孢類藥物殘留的檢測方法，依照如下步驟進行：

1)樣品預處理：稱取1-2g樣品于50mL離心管中，加入10mL乙二胺四乙酸(EDTA)-磷酸鹽緩沖溶液，50μL氯化膽堿鄰甲苯酚混合溶液、0.05-0.1g磁性石墨烯分子印跡聚合物，渦旋、超聲提取后，用磁力槍將磁性石墨烯分子印跡聚合物吸出；加入2mL?0.2％甲酸甲醇洗脫液將樣品中的頭孢類藥物殘留解析出來,氮氣吹干后用1.0mL水復溶、過0.22μm濾膜，獲得待測液；

2)待測液的檢測：運用HPLC-MS/MS，在質譜ESI源下正離子模式下測定，外標法定量。

所述乙二胺四乙酸(EDTA)-磷酸鹽緩沖溶液，按如下方法制備：稱取30.25g乙二胺四乙酸二鈉(Na₂EDTA·2H₂O)、6.0g磷酸二氫鈉(NaH₂PO₄)，超純水溶解，稀釋至1?000mL，用磷酸氫二鈉(Na₂HPO₄)調節pH值至8.5士0.1。

所述氯化膽堿鄰甲苯酚混合溶液，按如下方法制備：氯化膽堿、鄰甲苯酚、甲基叔丁基醚按0.1：0.2:1摩爾比例稱取適量，在50℃恒定攪拌下加熱，直至形成穩定的均勻透明的液體；將制備的混合溶液儲存在密封的小瓶中并保存在干燥器中。

所述磁性石墨烯分子印跡聚合物，按如下方法制備：