[發明專利]一種用于動物源性食品中頭孢類藥物殘留量的檢測方法

有效

• 申請號: 202111055413.6
• 申請日: 2021-09-09
• 公開（公告）號: CN113791150B
• 公開（公告）日: 2023-08-11
• 發明（設計）人: 鐘世歡;葉佳明;葉磊海;楊娜;蘇敏;陳小麗;王京;秦蕓樺
• 申請（專利權）人: 浙江公正檢驗中心有限公司;贊宇科技集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/36;G01N30/72
• 代理公司: 杭州九洲專利事務所有限公司 33101
• 代理人: 王之懷;王洪新

1.一種用于動物源性產品中頭孢類藥物殘留的檢測方法，依照如下步驟進行：

樣品預處理：稱取1-2?g樣品于50mL離心管中，加入10mL?乙二胺四乙酸-磷酸鹽緩沖溶液，50?μL氯化膽堿-鄰甲苯酚混合溶液、0.05-0.1?g磁性石墨烯分子印跡聚合物，渦旋、超聲提取后，用磁力槍將磁性石墨烯分子印跡聚合物吸出；加入2?mL?0.2%甲酸甲醇洗脫液將樣品中的頭孢類藥物殘留解析出來,?氮氣吹干后用1.0?mL水復溶、過0.22?μm濾膜，獲得待測液；

待測液的檢測：運用高效液相色譜-串聯質譜法，在質譜ESI源下正離子模式下測定，

外標法定量；

所述氯化膽堿-鄰甲苯酚混合溶液，按如下方法制備：氯化膽堿、鄰甲苯酚、甲基叔丁基醚按0.1：0.2:1?摩爾比例稱取適量，在50℃恒定攪拌下加熱，直至形成穩定的均勻透明的液體；將制備的混合溶液儲存在密封的小瓶中并保存在干燥器中；

所述磁性石墨烯分子印跡聚合物，按如下方法制備：

（1）石墨烯的修飾：將石墨烯粉末置于-18℃冰箱中冷凍1小時，稱取3g石墨烯粉末，緩慢加入200?mL按3:1:0.1比例混合的濃硫酸-濃硝酸-異丙醇混合溶液中，超聲反應1h，在80℃下加熱攪拌反應2?h，抽濾，用蒸餾水滌至中性，于50℃真空干燥至恒重，研磨過篩得到修飾后石墨烯，備用；

（2）溶劑熱法制備磁性碳納米管：稱取5.410?g?三氯化鐵和3.475?g?硫酸亞鐵置于250mL平底燒瓶中加入100?mL?水，60℃下恒溫磁力攪拌，全部溶解后，迅速加入25mL氨水2g；步驟（1）制得的修飾后石墨烯、5mL按1:1比例組成的乙二醇-聚乙二醇混合溶劑中，60℃下恒溫磁力攪拌2h得到黑色的混合溶液，用乙醇和水洗數次，于50℃真空干燥至恒重，獲得磁性碳納米管備用；

（3）將步驟（2）得到的磁性碳納米管、1?mmol?7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸、5?mmol?甲基丙烯酸、5?mmol丙烯酸、1mL二甲基亞砜、50?mL按9:1比例組成的乙醇-聚乙二醇混合溶液渦旋混合1min，再加入10?mmol乙二醇二甲基丙烯酸酯、0.2?g聚乙烯吡咯烷酮、0.010?g偶氮二異丁臍引發劑，通氮氣密封，80℃水浴超聲5h；?反應結束后磁場分離除去上清液，其余材料用體積比為9：1的甲醇-甲酸混合溶液反復超聲洗滌，直至上清液經示差檢測器檢測不到模板分子為止，于50℃真空干燥至恒重，得到磁性石墨烯分子印跡聚合物；

所述藥物為頭孢匹林、頭孢氨芐、頭孢洛寧、頭孢喹肟、頭孢唑林或頭孢噻呋；

所述樣品為豬肉、雞蛋或牛奶。

2.根據權利要求1所述的用于動物源性產品中頭孢類藥物殘留的檢測方法，其特征在于：所述乙二胺四乙酸-磷酸鹽緩沖溶液，按如下方法制備：稱取30.25g?乙二胺四乙酸二鈉、6.0?g磷酸氫二鈉，超純水溶解，稀釋至1?000?mL，用磷酸二氫鈉調節pH值至8.5士0.1。

3.根據權利要求2所述的用于動物源性產品中頭孢類藥物殘留的檢測方法，其特征在于：超高效液相色譜-三重四極桿質譜儀色譜條件為：

色譜柱：Agilent?RRHD?SB-C18色譜柱，2.1×100?mm,?1.8?μm；流速：0.25?mL/min；進樣量：2?μL；柱溫：35?℃，溶液A-0.1%甲酸水溶液，B-乙腈，含0.1%甲酸；梯度洗脫程序：0min，10%?B，0min?-0.20?min，11%?B，0.20?min-3.00?min，11%?-90%?B，3.00min-4.00?min，90%?B，90%?-11%?B，4.10?min-11.00?min，11%?B；

超高效液相色譜-三重四極桿質譜儀質譜條件為：

離子源：電噴霧離子源（ESI源）；

噴霧壓力：?40?psi；

干燥氣流速：?11?L/min；

干燥氣溫度：?300?℃；

毛細管電壓：?3500?V；

監測模式：?正離子監測模式。