[發(fā)明專利]水稻耐旱性調(diào)控基因OsNAC6的分子標(biāo)記及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202111007901.X | 申請日: | 2021-08-27 |
| 公開(公告)號: | CN113862387B | 公開(公告)日: | 2023-10-24 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 劉鴻艷;馬孝松;羅利軍;李恩熙 | 申請(專利權(quán))人: | 上海市農(nóng)業(yè)生物基因中心 |
| 主分類號: | C12Q1/6895 | 分類號: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 201106 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 水稻 耐旱性 調(diào)控 基因 osnac6 分子 標(biāo)記 及其 應(yīng)用 | ||
1.水稻耐旱性調(diào)控基因OsNAC6的分子標(biāo)記,其特征在于,所述分子標(biāo)記為OsNAC6_InDel_221,用于擴增所述分子標(biāo)記的引物的核苷酸序列如下:
OsNAC6_InDel_221F:5’-TAGCTAAATCCCGAAAGCAAATAAG-3’SEQ ID NO.1;
OsNAC6_InDel_221R:5’-CCACCATCGGCTTCCTCT-3’SEQ ID NO.2。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水稻耐旱性調(diào)控基因OsNAC6的分子標(biāo)記,其特征在于,所述水稻耐旱性調(diào)控基因OsNAC6的分子標(biāo)記位于1號染色體,由核苷酸序列為SEQ ID NO.1和SEQID NO.2的引物對在基因組位置上下游200bp內(nèi)擴增得到。
3.權(quán)利要求1或2所述的分子標(biāo)記在檢測和/或預(yù)測水稻的耐旱性中的應(yīng)用。
4.權(quán)利要求1-3任一項所述的分子標(biāo)記在水稻育種中的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用,其特征在于,所述水稻育種包括:
(1)檢測、預(yù)測水稻的耐旱性;和/或
(2)鑒定水稻耐旱性調(diào)控基因OsNAC6的基因型;
篩選耐旱水稻品種。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于,所述篩選耐旱品種的判斷標(biāo)準(zhǔn)為:
基因組DNA核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物擴增后,電泳顯示329bp的單條帶表示所述樣品含有強耐旱品種珍汕97B等位基因型;電泳顯示550bp的單條帶表示所述樣品含有不耐旱的品種IRAT109等位基因型;電泳顯示329bp和550bp兩條帶表示所述樣品為OsNAC6雜合基因型。
7.一種使用水稻耐旱性調(diào)控基因OsNAC6的分子標(biāo)記基因型鑒定及水稻育種的方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)提取供試水稻樣品基因組DNA;
2)利用核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物對步驟1)中所提取基因組進(jìn)行PCR擴增,獲得擴增產(chǎn)物;
3)瓊脂糖凝膠檢測擴增產(chǎn)物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,所述PCR擴增的擴增體系包含:Taq酶,模板DNA,核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物,PCR buffer。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法,其特征在于,所述PCR擴增的反應(yīng)程序為:95±1℃預(yù)變性4-6min,然后按98±1℃18-22s,53±1℃下18-22s,72±1℃下28-32s進(jìn)行30-35個循環(huán),最后72±1℃下延伸4-6min。
10.一種水稻耐旱性調(diào)控基因OsNAC6的鑒定試劑盒,其特征在于,包括:核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物,所述引物用于擴增水稻耐旱性調(diào)控基因OsNAC6的分子標(biāo)記,所述分子標(biāo)記為OsNAC6_InDel_221。
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