[發(fā)明專利]共載CD73抗體和阿霉素的脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111000301.0
• 申請日: 2021-08-30
• 公開（公告）號: CN113440610B
• 公開（公告）日: 2021-12-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭紅梅;祁同同;林貴梅
• 申請（專利權(quán)）人: 山東大學(xué)
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395;A61K31/704;A61K9/127;A61K47/60;A61P35/00
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 孫維傲

本發(fā)明提供了共載CD73抗體和阿霉素的脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用，其中，所述共載CD73抗體和阿霉素的脂質(zhì)體內(nèi)為包裹有阿霉素的脂質(zhì)核心，脂質(zhì)核心外修飾有CD73抗體，并且CD73抗體通過偶聯(lián)在磷脂PEG活性酯膠束上，然后修飾于脂質(zhì)核心表面。本發(fā)明提供的共載CD73抗體和阿霉素的脂質(zhì)體降低了在三陰性乳腺癌治療中阿霉素的耐藥性和毒副作用，改善阿霉素在體內(nèi)的生物分布，提高生物利用度，并扭轉(zhuǎn)了三陰性乳腺癌腫瘤內(nèi)的免疫微環(huán)境，使其轉(zhuǎn)化為熱腫瘤，實(shí)現(xiàn)了對三陰性乳腺癌的較好的治療效果。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及共載CD73抗體和阿霉素的脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

乳腺癌是全世界女性最常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率和死亡率在多種癌癥中所占比率位居首位。三陰性乳腺癌（Triple negative breast cancer, TNBC）是其中的一種亞型，其病理組織學(xué)分級較差，惡性程度高，腫瘤組織生長很快，一旦發(fā)病，進(jìn)展迅速，腫瘤容易出現(xiàn)早期的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，其最大的特點(diǎn)就是侵襲性強(qiáng)，簡單來說，就是特別容易通過血液或淋巴轉(zhuǎn)移到身體的其他組織，主要表現(xiàn)為內(nèi)臟轉(zhuǎn)移（肺轉(zhuǎn)移和肝轉(zhuǎn)移）和腦轉(zhuǎn)移。并且它的臨床預(yù)后較差，對于各種治療方案均不敏感，治療效果不理想。目前常用的局部治療即為手術(shù)治療，但三陰乳腺癌患者手術(shù)治療后局部復(fù)發(fā)率及區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率均高于非三陰乳腺癌。因此，腫瘤大小、局部淋巴結(jié)狀況等常用的局部尺度也難以評估三陰乳腺癌的預(yù)后。以及目前針對惡性腫瘤治療中較為成熟的內(nèi)分泌治療及針對HER2基因的分子靶向治療對三陰乳腺癌均無效。因此，需尋找更為有效的治療方案。

阿霉素（DOX）屬于蒽環(huán)類藥物，抗瘤譜廣，抗瘤作用強(qiáng)，療效確切，不僅能殺死腫瘤細(xì)胞，還能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞免疫原性死亡(immunogenic cell death, ICD)，但臨床上應(yīng)用的化療藥阿霉素會(huì)導(dǎo)致較為嚴(yán)重的副作用，如引起脫發(fā)、骨髓抑制和心臟毒性等，特別是心臟毒性是這類藥物最嚴(yán)重的毒副作用，限制了其在臨床上的應(yīng)用，而且長期的阿霉素化療會(huì)導(dǎo)致耐藥性。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，目前比較有效的治療方案多為免疫和化療相結(jié)合，但由于三陰性乳腺癌的腫瘤微環(huán)境相當(dāng)于免疫耗盡(cold)的狀態(tài)，對免疫檢查點(diǎn)抑制劑不敏感。由于TNBC免疫衰竭(cold)的微環(huán)境，免疫治療的臨床應(yīng)用也受到限制。同時(shí)，腫瘤缺氧誘導(dǎo)廣泛的代謝和免疫變化網(wǎng)絡(luò)有利于腫瘤的生長和進(jìn)展，缺氧限制了能量來源的可用性，并誘導(dǎo)細(xì)胞外ATP的積累，隨后是腺苷的積累。細(xì)胞外ATP會(huì)迅速降解為腺苷，腺苷與P1嘌呤能受體(也稱為腺苷能受體)結(jié)合，以阻礙免疫細(xì)胞浸潤和激活。為此，為了改善現(xiàn)有技術(shù)的不足，發(fā)明人進(jìn)行了以下設(shè)想，包括將TNBC由冷腫瘤向熱腫瘤狀態(tài)的轉(zhuǎn)化，也就是將TNBC腫瘤內(nèi)部的環(huán)境從沒有或者只有很少的免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)楹休^多免疫細(xì)胞，包括T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等，以實(shí)現(xiàn)最大效果的發(fā)揮抗癌作用，同時(shí)，阻斷腺苷通路以有效逆轉(zhuǎn)腫瘤微環(huán)境的免疫抑制作用。

與以上設(shè)想不謀而合的，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)CD73在腫瘤微環(huán)境的癌細(xì)胞、DC細(xì)胞、Treg細(xì)胞、NK細(xì)胞、MDSC、TAM等多種細(xì)胞系表面均有表達(dá)。并且CD73的表達(dá)收到低氧誘導(dǎo)因子-1（HIF-1）、TGF-β、EGFR、AKT、β-catenin等分子的調(diào)控。與腫瘤病人的不良預(yù)后密切相關(guān)。CD73主要通過腺苷通路產(chǎn)生抗腫瘤免疫抑制作用，促進(jìn)腫瘤的生長，轉(zhuǎn)移及血管新生。此外，CD73還參與抗腫瘤藥物耐藥性產(chǎn)生，為腫瘤治療帶來極大挑戰(zhàn)。基于此，發(fā)明人嘗試阻斷CD73能量通路，采用CD73抗體與阿霉素協(xié)同給藥以嘗試應(yīng)用于對于三陰乳腺癌的治療。但是出乎意料的，以組合物以及制備成偶聯(lián)物的給藥形式難以發(fā)揮預(yù)期的理想效果，表現(xiàn)為雖然能夠提高免疫化療的敏感性，但是阿霉素的心臟毒性以及耐藥性的改善并不明顯，對于三陰乳腺癌的治療效果仍有待提高。