[發明專利]分離、測定花椒提取物及其制品中山椒素含量方法及應用

在審

• 申請號: 202110997620.7
• 申請日: 2021-08-27
• 公開（公告）號: CN113777190A
• 公開（公告）日: 2021-12-10
• 發明（設計）人: 蔡君;胡仕林;陳巖冰;晏家瑛;何天平
• 申請（專利權）人: 重慶市日用化學工業研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所(普通合伙) 11308
• 代理人: 黎昌莉

1.分離花椒提取物或花椒提取物制品中山椒素的方法，其特征在于，所述山椒素為羥基-α-山椒素、羥基-β-山椒素、羥基-γ-山椒素、羥基-ε-山椒素、羥基-γ-異山椒素、γ-山椒素其中的一種或多種；所述方法包括：使用液相色譜法進行梯度洗脫，其中，流動相為流動相A與流動相B的混合溶液，所述流動相A為有機溶劑，所述流動相B為磷酸水溶液，所述梯度洗脫程序為：

0≤t＜12min，所述流動相B的體積分數為78％-82％，所述流動相A的體積分數為18％-22％,12≤t＜15min，所述流動相B的體積分數為53％-57％，所述流動相A的體積分數為43％-47％，15≤t＜20min，所述流動相B的體積分數為58％-62％，所述流動相A的體積分數為38％-42％，20≤t＜38min，所述流動相B的體積分數為53％-57％，所述流動相A的體積分數為43％-47％，38≤t＜39min，所述流動相B的體積分數為18％-22％，所述流動相A的體積分數為78％-82％，t≥39min，所述流動相B的體積分數為78％-82％，所述流動相A的體積分數為18％-22％。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷酸水溶液為體積百分數0.05％-0.15％磷酸水溶液。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述液相色譜法的柱溫為35-40℃。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述液相色譜法的進樣流速為0.8-1.2mL/min。

5.測定花椒提取物或花椒提取物制品中山椒素含量的方法，其特征在于，所述方法包括步驟：(1)使用權利要求1-4任一所述的方法對待測樣品進行液相色譜分離；(2)進入檢測器進行檢測。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述檢測器的波長為254-270nm。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，檢測后使用外標法計算含量。

8.測定制備花椒提取物或花椒提取物制品中麻素含量的方法，所述方法包括以下步驟：(1)配制花椒提取物溶液或花椒提取物制品溶液；(2)使用權利要求7所述的方法測定并計算所述花椒提取物或花椒提取物制品中山椒素含量及其總和，總和即為麻素含量；

步驟(1)中，所述配制花椒提取物溶液的方法包括：取花椒提取物配制成0.002-0.008g/ml濃度的樣品A1，然后將樣品A1稀釋成濃度為0.0002-0.0008g/ml的樣品B1；

或花椒提取物制品溶液制備的方法包括：取花椒提取物制品0.2g-0.5g于離心管中，加入甲醇，超聲后，離心分層，轉移上層甲醇萃取液至10mL容量瓶中，下層加入甲醇再萃取一次，合并萃取液，用甲醇定容至刻度，為樣品A2；取樣品A2溶液稀釋10倍為樣品B2；

步驟(2)中，所述樣品A1和樣品B1分別進樣，或所述樣品A2和樣品B2分別進樣，所述山椒素為羥基-α-山椒素、羥基-β-山椒素、羥基-γ-山椒素、羥基-ε-山椒素、羥基-γ-異山椒素和γ-山椒素，所述麻素含量為所述山椒素總和含量。

9.權利要求1-4任一所述的方法在制備花椒提取物或花椒提取物制品中山椒素的應用。

10.分離、鑒定花椒提取物或花椒提取物制品中山椒素的液相色譜流動相，其特征在于，所述山椒素為羥基-α-山椒素、羥基-β-山椒素、羥基-γ-山椒素、羥基-ε-山椒素、羥基-γ-異山椒素、γ-山椒素其中的一種或多種；所述液相色譜流動相包括流動相A與流動相B，所述流動相A為有機溶劑，所述流動相B為磷酸水溶液；所述液相色譜流動相中，所述流動相B的體積分數為78％-82％，所述流動相A的體積分數為18％-22％；或所述液相色譜流動相中，所述流動相B的體積分數為53％-57％，所述流動相A的體積分數為43％-47％；或所述液相色譜流動相中，所述流動相B的體積分數為58％-62％，所述流動相A的體積分數為38％-42％；或所述液相色譜流動相中，所述流動相B的體積分數為18％-22％，所述流動相A的體積分數為78％-82％。