[發明專利]超級增強子基因序列在促進人B2M基因表達中的用途在審
| 申請號： | 202110992277.7 | 申請日： | 2021-08-27 |
| 公開（公告）號： | CN113801881A | 公開（公告）日： | 2021-12-17 |
| 發明（設計）人： | 柳華;王飛;李然 | 申請（專利權）人： | 浙江大學 |
| 主分類號： | C12N15/113 | 分類號： | C12N15/113;C12N15/867 |
| 代理公司： | 杭州天昊專利代理事務所(特殊普通合伙) 33283 | 代理人： | 向慶寧;曹小燕 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 超級 增強 基因 序列 促進 b2m 表達 中的 用途 | ||
1.一種增強子，其特征在于，增強子的區域位于人B2M基因附近，在IFN-γ刺激下能形成超級增強子。
2.如權利要求1所述的增強子，其特征在于，所述增強子區域位于chr15:45002906-45022119，所述chr15:45002906-45022119具有如SEQ ID NO：7所示的序列。
3.如權利要求2所述的增強子，其特征在于，所述增強子區域具有6個活性序列，分別為E1～E6，所述E1～E6分別具有如SEQ ID NO：1～SEQ ID NO：6所述的序列。
4.如權利要求3所述的增強子，其特征在于，所述增強子區域的核心增強子片段為E2。
5.如權利要求1～4任一項所述的增強子用于增強B2M基因表達中的用途。
6.如權利要求5所述的用途，其特征在于，所述增強子在IFN-γ刺激下能變成超級增強子，所述超級增強子能進一步促進B2M基因的表達。
7.一種降低膜HLA-I類蛋白表達的方法，其特征在于，將如權利要求1～4任一項所述的增強子的全部或部分序列敲除、敲低或沉默。
8.如權利要求7所述的方法，其特征在于，所述膜HLA-I類蛋白包括HLA-A、HLA-B、HLA-C中的一種以及B2M蛋白。
9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)通過CRISPR基因編輯方法敲低增強子全部或部分序列；
(2)分選出敲低了增強子全部或部分序列的細胞。
10.如權利要求9所述的方法，其特征在于，所述CRISPRi的引導核苷酸序列分別為sgRNA F和sgRNA R，所述sgRNA F和sgRNA R的序列分別如SEQ ID NO：16和SEQ ID NO：17所示；所述被敲低的增強子序列位于chr15:45,004,417-45,004,436。
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