[發明專利]視網膜色素上皮細胞誘導培養基及其應用有效
| 申請號: | 202110962908.0 | 申請日: | 2021-08-20 |
| 公開(公告)號: | CN113481160B | 公開(公告)日: | 2022-04-29 |
| 發明(設計)人: | 張晗 | 申請(專利權)人: | 北京太東生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N5/0793 | 分類號: | C12N5/0793;C12N5/079 |
| 代理公司: | 北京華進京聯知識產權代理有限公司 11606 | 代理人: | 信建 |
| 地址: | 100089 北京市海*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 視網膜 色素 上皮細胞 誘導 培養基 及其 應用 | ||
1.視網膜色素上皮細胞誘導培養基,其特征在于,為包含如下成分的Neurobasal培養基:
B27補充劑、L-谷氨酰胺 2 mM ~ 4 mM、丙酮酸鈉 1 mM ~ 2 mM、β-巰基乙醇0.05 mM ~0.15 mM、L-抗壞血酸50 μM ~ 100 μM、cAMP 1 mM ~ 2 mM、BMP抑制劑50 nM ~100 nM、GSK-3β抑制劑 10 μM ~ 15 μM、ALK抑制劑10 μM ~ 20 μM以及SHH20 ng/ml ~ 50ng/ml;
其中,所述B27補充劑的添加量為所述Neurobasal培養基體積的1/60~1/40;所述BMP抑制劑為LDN193189;所述GSK-3β抑制劑為CHIR 99021;所述ALK抑制劑為SB431542。
2.視網膜色素上皮細胞培養方法,其特征在于,將視網膜色素上皮接種于權利要求1所述的誘導培養基中進行培養。
3.根據權利要求2所述的視網膜色素上皮細胞培養方法,其特征在于,培養時間大于等于7天。
4.根據權利要求2所述的視網膜色素上皮細胞培養方法,其特征在于,細胞在培養第2~4天后傳代一次。
5.權利要求1所述的誘導培養基,或權利要求2~4任一項所述的方法在制備多巴胺能神經元樣細胞中的應用。
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