[發明專利]針對黃熱病毒NS1蛋白的抗體及其應用

有效

• 申請號: 202110954305.6
• 申請日: 2021-08-19
• 公開（公告）號: CN113683690B
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發明（設計）人: 高福;嚴景華;李燕;仵麗麗;王奇慧;戴連攀;馬素芳
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;C12N15/13;G01N33/569;A61K39/42;A61P31/14
• 代理公司: 北京慧尚知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11743
• 代理人: 鮑曉芳

本發明提供了一種針對黃熱病毒NS1蛋白的抗體及其應用，所述抗體包括YD40和/或YB36抗體；本發明提供了一種高度靈敏的黃熱病毒ELISA雙抗夾心檢測方法。此方法在普通實驗室即可進行操作，而且可進一步開發為多樣的試劑盒，如膠體金，ELISA試劑盒等，便于使用。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及一種針對黃熱病毒NS1蛋白的抗體及其應用。

背景技術

黃熱病毒(YFV)是以伊蚊為媒介在蟲媒傳染病毒，與寨卡病毒(ZIKV)、西尼羅河病毒(WNV)和登革熱病毒(DENV)等同屬黃病毒科黃病毒屬。黃熱病毒的傳播媒介是蚊子，因此，在蚊子流行地區和發展中國家中黃熱病的暴發率很高。當前主要流行于非洲和南美洲的熱帶、亞熱帶地區。黃熱病毒可引起嚴重危害人類健康的黃熱病，表現為黃疸，出血、甚至多系統的器官衰竭。因黃熱病癥狀與同科病毒引起的疾病癥狀類似，且同一地區還可能同時流行黃熱病毒和其它黃病毒，因此在臨床上憑借臨床癥狀難以鑒別。此外，由于黃病毒科的病毒在抗原性上具有相似的特征，抗體可能會具有交叉反應性。而且，登革病毒還會引起ADE(抗體依賴的增強作用)，這些情況使得臨床診斷更為復雜。以上問題也對開發黃熱病的血清學診斷方法提出了巨大挑戰。

診斷黃熱病毒感染的實驗室方法主要包括病毒分離、核酸檢測、抗原檢測和血清學檢測等。目前最可靠的診斷方法主要是提取病毒RNA后進行qRT-PCR，該方法費時、成本高昂且需要在特定的實驗室由專業人員進行操作，使用的儀器也較復雜，無法廣泛便捷的應用。因此，迫切需要開發一種操作簡單、可在感染早期即可檢測產品和方法，且可在偏遠地區使用。

黃熱病毒的非結構蛋白1(nonstructural?protein?1，NS1)是比較保守的糖蛋白，有膜型和分泌型兩種形式，在感染機體中表達量高且時間長，是檢測黃熱病毒感染的良好靶點。

發明內容

針對現有技術存在的不足，本發明的目的之一在于提供一種針對黃熱病毒NS1非結構蛋白的抗體及其在制備產品中的應用。

本發明目的之二在于基于本發明公開的抗體開發一種高度靈敏的黃熱病毒的檢測試劑盒和檢測方法。此試劑盒或方法在普通實驗室即可進行操作，而且可進一步開發為多樣的試劑盒，如膠體金，ELISA等，便于使用。

為實現上述目的，本發明具體技術方案如下：

第一方面，本發明提供了一種針對黃熱病毒NS1非結構蛋白的抗體，所述抗體包括YD40和/或YB36抗體；

其中，YD40抗體包含如SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列的重鏈可變區，如SEQ?IDNO:2所示的氨基酸序列的輕鏈可變區；

YB36抗體包含如SEQ?ID?NO:3所示的氨基酸序列的重鏈可變區，如SEQ?ID?NO:4所示的氨基酸序列的輕鏈可變區。

在一些實施方案中，YD40或YB36抗體還包含:如SEQ?ID?NO:5所示的氨基酸序列的重鏈恒定區和如SEQ?ID?NO:6所示的氨基酸序列的輕鏈恒定區。

在一些實施方案中，以上抗體輕鏈為Kappa輕鏈。

在一些實施方案中，所述YB36或YD40抗體還包括N端信號肽，所述信號肽氨基酸序列為SEQ?ID?NO:7；所述信號肽的核苷酸酸序列如SEQ?ID?NO:8所示。

第二方面，本發明提供了一種核酸分子，所述核酸分子包含編碼以上所述抗體的核苷酸序列。

在一些實施方案中，所述核苷酸序列如SEQ?ID?NO:9-14所示；

其中，針對YD40抗體，重鏈可變區的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:9所示，輕鏈可變區的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:10所示；