[發明專利]生產漢黃芩素類化合物的基因工程酵母菌、其構建方法及應用在審
| 申請號： | 202110918657.6 | 申請日： | 2020-04-07 |
| 公開（公告）號： | CN113621530A | 公開（公告）日： | 2021-11-09 |
| 發明（設計）人： | 蔡孟浩;錢芷蘭;陳鑫潔;趙清 | 申請（專利權）人： | 華東理工大學;上海辰山植物園 |
| 主分類號： | C12N1/19 | 分類號： | C12N1/19;C12N15/29;C12N15/31;C12N15/81;C12P17/06;C12R1/84 |
| 代理公司： | 上海專利商標事務所有限公司 31100 | 代理人： | 陳靜 |
| 地址： | 200237 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 生產 黃芩 化合物 基因工程 酵母菌 構建 方法 應用 | ||
1.一種生產漢黃芩素的方法，其特征在于，所述方法包括：
(1)提供酵母工程菌，所述酵母工程菌中轉化有外源的下組基因的表達盒：F8H，PFOMT5；和
(2)培養(1)的酵母工程菌，并加入白楊素作為前體，生產漢黃芩素。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述F8H和/或PFOMT5來自于黃芩(Scutellaria baicalensis Georgi，Sb)。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的酵母工程菌為畢赤酵母。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，該畢赤酵母中KU70基因功能被下調或缺失。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)中利用酵母培養基進行培養，培養期間補加碳源。
6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述碳源為葡萄糖；更佳地每隔12～36小時添加1次葡萄糖，添加至終濃度1～4％(v/v)；較佳地，起始培養時在酵母培養基中添加白楊素，其發酵液中的終濃度為50～800μM；較佳地，步驟(2)的培養時間為55～95小時。
7.用于生產漢黃芩素的酵母工程菌，其特征在于，所述酵母工程菌中包含外源的下組基因的表達盒：F8H、PFOMT5。
8.如權利要求7所述的酵母工程菌，其特征在于，所述酵母工程菌為畢赤酵母；較佳地，所述F8H和/或PFOMT5來自于黃芩。
9.基因組合的用途，所述的基因組合包括下組基因：F8H和/或PFOMT5，該基因組合用于轉化入酵母工程菌中，制備漢黃芩素類化合物；較佳地，所述F8H和/或PFOMT5來自于黃芩。
10.用于生產漢黃芩素的試劑盒，其特征在于，其中包括：F8H和PFOMT5基因或含有所述基因的表達構建體或酵母細胞，以及白楊素或含有白楊素的培養基；較佳地，所述F8H和/或PFOMT5來自于黃芩。
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