[發明專利]一種心葉椴的組培工廠化育苗方法

在審

• 申請號: 202110900948.2
• 申請日: 2021-08-06
• 公開（公告）號: CN113615573A
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 張文杰;尹翠翠;冷江明;郭俊清
• 申請（專利權）人: 蘇州回文生物種業科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙) 32231
• 代理人: 李嘉寧

本發明屬于植物培植領域，涉及一種組織培養育苗的方法，具體涉及一種心葉椴的生根及育苗方法。本發明公開了一種心葉椴的生根及育苗方法，包括以下步驟：1)無菌外植體的制備；2)無菌苗的制備；3)組培苗的制備；4)生根苗組培苗的制備；5)煉苗。本發明提供的心葉椴的生根及育苗方法，培養周期短，增殖和生根的總周期在10周左右；且增殖系數較高可達1:4?4.5，增殖后的株高約3.5cm，增殖后的成活合格率大于98％；生根率100％，且生根后的成活率大于99％；移栽后的成活率大于98％，適合心葉椴的工廠化育苗。

技術領域

本發明屬于植物培植領域，涉及一種組織培養育苗的方法，具體涉及一種心葉椴的生根及育苗方法。

背景技術

心葉椴(學名：TiliacordataMill.)是椴樹科椴樹屬植物，野生狀態下樹高可達35米。葉近圓形，長2-8厘米，基部心形?；ǖS色，有5片花瓣，芳香，花期6-8月，是優質的蜜源樹種。果近球形，徑4-8厘米，木質，灰綠色，具不明顯棱，密被絨毛，果期8-9月。原產自英國西部石灰石懸崖和潮濕的林地中。美國、法國、英國、德國、荷蘭等國家均有引種栽培，中國新疆、南京、上海、青島、大連及北京等地有引種栽培。較耐陰，喜光，耐寒，抗煙塵。心葉椴干形通直，材質優良，樹皮可作纖維，堅果球形，果實能作咖啡代用品，純凈的果實含油58％，六月下旬至七月中旬逐漸開花，花有香氣是很好的密源植物?？篃焿m，是珍貴的綠化用材樹種、是世界上最流行的庭蔭樹及行道樹之一。

椴樹種子由于種皮硬骨質不透性、胚休眠以及存在種子內抑制物，造成椴樹種子發芽率很低、出苗不齊，同時椴樹花雄蕊先熟因而自花幾乎不育，異花授粉，結實率也較低，一般不超過10％。椴樹采用種子繁殖的方式效率低；組織培養為一種常見的提高產量的方式。

目前，關于心葉椴的組織培養相關研究較少。發明專利201710316354.0公開了一種椴樹的組織培養基及其快速繁殖的方法，公開了一種通過組織培養技術繁殖椴樹的方法，具體步驟如下：步驟一：選用外植體，外植體選用健康椴樹當年生枝條的芽體飽滿的半木質化枝條莖尖部分；步驟二：消毒及初代培養，消毒處理外植體，并進行誘導；步驟三：繼代培養，外植體莖尖出現新梢時將外植體轉接到增殖培養基內，在一定的培養環境下，每隔四周轉接到新的增殖培養基內；步驟四：生根培養：經過繼代培養的椴樹組培苗，外植體出現頂芽時，取2～3cm的頂芽，放入生根培養基，直至生根完成培養。

該發明雖然通過四個步驟，實現了對椴樹的組培繁殖，但是其實施步驟中始終任然使用“外植體”進行繼代培養，并沒有實現植株的再生以及高效的工廠化生產。

因此研究一種操作簡單、成本低廉、成活率高、生根率高、能保持母本優良性狀的心葉椴的生根及育苗方法，適合工廠化育苗具有重要的意義。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，充分利用了心葉椴各個部位的增殖分生特點，選取優良母株新發的嫩枝作為組織培養的外植體，提供一種操作簡單、成本低廉、成活率高、生根率高、品種品質有保障的，適合工廠化育苗的方法，從而改變目前心葉椴人工規?；N植種品種資源短缺的現狀。目前本發明已經實現了工廠化生產。

本發明是通過如下技術方案實現上述目的的，一種心葉椴的組培工廠化育苗方法，包括如下步驟：

外植體的選擇:選擇健壯的椴樹，用芽體飽滿的新生枝條作為外植體；

外植體的消毒:將外植體清洗消毒后，晾干接種于啟動培養基上；具體步驟為：

先用自來水沖洗外植體30min，把表面沖洗干凈；將枝條切成2-3cm的小段，用容器盛放再沖洗一遍(切成小段以后，都放進帶蓋的玻璃容器中進行清洗消毒)；用70％的酒精浸泡1min，轉移到超凈工作臺內，然后用0.1％的氯化汞溶液浸泡8min，最后用0.15％的無菌檸檬酸水浸洗3遍，晾干后接種于啟動培養基上。

啟動培養：