[發明專利]一種種植后階段胚胎體外培養液及其培養方法

在審

• 申請號: 202110880061.1
• 申請日: 2021-08-02
• 公開（公告）號: CN113621560A
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 李達;高英卓;楊大磊
• 申請（專利權）人: 中國醫科大學附屬盛京醫院
• 主分類號: C12N5/073
• 分類號: C12N5/073
• 代理公司: 廣州藍晟專利代理事務所(普通合伙) 44452
• 代理人: 丁海燕

1.一種種植后階段胚胎體外培養液，包括：

余量為基礎培養液。

所述的抗氧化劑劑可為N-乙酰基-半胱氨酸、半胱氨酸、維生素E、維生素C、β-巰基乙醇中的至少一種。

2.根據權利要求1所述的種植后階段胚胎體外培養液，其特征在于，血清替代物為knock-out血清替代物、人血小板裂解物、人AB血清中的至少一種。

3.根據權利要求1所述的種植后階段胚胎體外培養液，其特征在于，所述的基礎培養液為Advanced DMEM/F12、DMEM/F12、TCM-199、MEM、Ham′s F-10、RPMI 1640中的至少一種。

4.根據權利要求3所述的種植后階段胚胎體外培養液，其特征在于，還包括RevitaCell^TM，且用量為1-2X。

5.根據權利要求4所述的種植后階段胚胎體外培養液，其特征在于，還包括青霉素、鏈霉素、青鏈霉素雙抗、慶大霉素中的至少一種，且用量為40-60IU/mL。

6.根據權利要求5所述的種植后階段胚胎體外培養液，其特征在于，還包括CEPT混合物，所述的CEPT混合物包含以下組分：

。

7.根據權利要求6所述的種植后階段胚胎體外培養液，其特征在于，包括：

CEPT混合物：

余量為基礎培養液

所述的抗氧化劑為N-乙酰基-半胱氨酸、半胱氨酸、維生素E、維生素C、β-巰基乙醇中的至少一種。

8.根據權利要求4所述的種植后階段胚胎體外培養液，其特征在于，包括：

余量為基礎培養液

所述的抗氧化劑為N-乙酰基-半胱氨酸、半胱氨酸、維生素E、維生素C、β-巰基乙醇中的至少一種。

9.根據權利要求4所述的種植后階段胚胎體外培養液，其特征在于，包括：

余量為基礎培養液

所述的抗氧化劑為N-乙酰基-半胱氨酸、半胱氨酸、維生素E、維生素C、β-巰基乙醇中的至少一種。

10.一種種植后階段胚胎體外培養的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)預平衡培養液：將權利要求1-9任一項種植后階段胚胎體外培養液，在37℃、21％O₂、5％CO₂濕式培養箱中平衡過夜，得預平衡種植后階段胚胎培養液；

(2)胚胎種植后階段受精10-14天體外培養：受精后第10天取出同天提交專利一種圍種植期胚胎體外培養液及其培養方法中用圍種植期培養液培養至受精后第9天的舊培養液，加入上述步驟(1)的預平衡種植后階段胚胎培養液，并且新添加量大于取出量，胚胎在37℃、21％O₂、5％CO₂濕式培養箱中培養，受精11-14天體外培養，每天取出前一天舊培養液，加入上述步驟(1)的預平衡種植后階段胚胎培養液，并且新添加量大于取出量，胚胎在37℃、21％O₂、5％CO₂濕式培養箱中培養，培養至14天終止。