[發明專利]一種與乳腺癌診斷相關的血清外泌體tsRNA標志物及其應用

在審

• 申請號: 202110810191.8
• 申請日: 2021-07-18
• 公開（公告）號: CN113416784A
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發明（設計）人: 金芳芳;陳曦
• 申請（專利權）人: 南京中醫藥大學
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 江蘇東銀律師事務所 32381
• 代理人: 江艷麗

本發明公開了一種與乳腺癌診斷相關的血清外泌體tsRNA標志物及其應用，屬于分子生物學及腫瘤學領域。所述標志物是血清外泌體tsRNA中的tRF?Glu?TTC?009、tRF?Gly?TCC?010、tRF?His?GTG?005的組合。本發明的標志物具有較高的敏感性和特異性，有助于乳腺癌的輔助診斷。

技術領域

本發明屬于分子生物學及腫瘤學領域，涉及一種與乳腺癌相關的血清外泌體tsRNA標志物及其應用。

背景技術

乳腺癌是女性發病率和死亡率最高的腫瘤類型，據統計，全世界每年乳腺癌發病人數為210萬，死亡人數為63萬，均高居女性惡性腫瘤的第一位。目前，雖然乳腺癌預后較好，但因其發病率較高，依然是女性因癌癥死亡的首要原因。

目前，影像學檢查、乳腺癌標志物檢測和穿刺活檢是臨床常用的乳腺癌診斷方法，但這些方法具有一定局限性： PET-CT等影像方法能對微小腫瘤進行診斷檢測，但其設備要求高且操作繁瑣，無法從分子水平反映實際的治療效果，普及和應用受到限制；一些常規的乳腺癌血清標志物如糖蛋白CA153、癌胚抗原CEA等雖可用于乳腺癌診斷，但其靈敏性和特異性差。穿刺活檢是目前最可靠的乳腺癌診斷方法，但存在一定的假陰性率，不能準確判斷乳腺癌，同時也難以對乳腺癌進行早期診斷和治療效果監控。因此，篩選敏感有效的生物標志物，在早期對乳腺癌進行診斷檢測，對提高乳腺癌治療和預后具有重要意義。

tsRNAs（tRNA-derived small RNAs，tRNA來源的小RNA）是一類新型非編碼小RNA，來源于tRNA成熟體或前體。最新研究發現tsRNA參與調節多種生理病理功能，如腫瘤、神經系統疾病、應激、病毒感染等多方面。

近年來，大量研究發現體液中穩定存在的非編碼小RNA可作為疾病診斷的分子標志物。近期研究發現tsRNAs在血清中也能穩定存在且含量豐富，但是，外泌體中tsRNA與乳腺癌方面的相關研究目前尚未見報道，因此，篩選乳腺癌中異常表達的血清外泌體tsRNAs作為生物標志物，并研發相應的診斷試劑盒，對乳腺癌的診治十分必要。

發明內容

本發明的首要目的是提供一種血清外泌體tsRNA標志物，該標志物的異常表達與乳腺癌發生發展相關。

本發明的第二個目的是提供上述血清外泌體tsRNA標志物的引物和莖環引物。

本發明的第三個目的是提供上述血清外泌體tsRNA標志物及其引物在制備乳腺癌診斷試劑盒中的應用。

本發明的第四個目的是提供乳腺癌診斷的試劑盒。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種用于乳腺癌診斷相關的血清外泌體tsRNA 標志物，所述的標志物為以下三種序列的組合：

tRF-Glu-TTC-009：SEQ ID No.1；

tRF-Gly-TCC-010：SEQ ID No.2；

tRF-His-GTG-005：SEQ ID No.3。

本發明提供了上述的血清外泌體tsRNA 標志物的莖環引物，莖環引物為：

tRF-Glu-TTC-009的莖環引物為SEQ ID No.4；

tRF-Gly-TCC-010的莖環引物為SEQ ID No.5；

tRF-His-GTG-005 的莖環引物為SEQ ID No.6。

本發明提供了上述的血清外泌體tsRNA標志物的引物，引物為：

tRF-Glu-TTC-009的正向引物為SEQ ID No.7；

tRF-Gly-TCC-010的正向引物為SEQ ID No.8；

tRF-His-GTG-005 的正向引物為SEQ ID No.9；