[發明專利]一種小鼠胚胎成纖維細胞直接重編程為黑素細胞的方法

在審

• 申請號: 202110785524.6
• 申請日: 2021-07-12
• 公開（公告）號: CN113584086A
• 公開（公告）日: 2021-11-02
• 發明（設計）人: 李遇梅;張怡萱;劉莉萍;鄭允文
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: C12N15/867
• 分類號: C12N15/867;C12N15/12;C12N5/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供一種小鼠胚胎成纖維細胞直接重編程為黑素細胞的方法，包括如下步驟：制備高質量的濃縮慢病毒用于轉染備選轉錄因子；將小鼠胚胎成纖維細胞直接重編程為黑素細胞；優化篩選可用于黑素細胞直接重編程的轉錄因子；鑒定誘導黑素細胞的功能。本發明是一種優化的高效的黑素細胞直接重編程方法，簡化并優化的黑素細胞直接重編程體系，主要包括兩方面：制作高質量濃縮病毒和優化重編程培養基成分，提高直接重編程所得到的黑素細胞的功能；篩選作用最顯著的轉錄因子用于黑素細胞直接重編程；對直接重編程的黑素細胞進行功能鑒定，為色素脫失性疾病比如白癜風的病人提供新的治療策略。

技術領域

本發明屬于細胞生物學技術領域，尤其涉及一種小鼠胚胎成纖維細胞直接重編程為黑素細胞的方法。

背景技術

白癜風是一類嚴重影響著人們身心健康的皮膚疾病。由于基因突變，氧化應激，自身免疫，代謝紊亂等原因導致缺失黑素細胞，停止黑色素分泌，進而發生白癜風疾病。尤其是大面積和生長于面部的白癜風給患者帶來了很大的困擾(Ezzedine K,EleftheriadouV,Whitton M,van Geel N.Vitiligo.Lancet.2015 Jul 4；386(9988):74-84.doi:10.1016/S0140-6736(14)60763-7.Epub 2015 Jan 15.PMID:25596811.)。目前對于白癜風的治療，可以使用皮質類固醇，免疫調節劑等藥物(Speeckaert R,van Geel N.Vitiligo:An Update on Pathophysiology and Treatment Options.Am J ClinDermatol.2017Dec；18(6):733-744.doi:10.1007/s40257-017-0298-5.PMID:28577207.)；也可以用全身或局部光療(Cortelazzi C,Pellacani G,Raposio E,et al.Vitiligo management:combination of surgical treatment and phototherapy under reflectance confocalmicroscopy monitoring.Eur Rev Med Pharmacol Sci.2020 Jul；24(13):7366-7371.doi:10.26355/eurrev_202007_21904.PMID:32706075.)；還有打孔皮膚移植，自體黑素細胞移植等手術治療(Mohammad TF,Hamzavi IH.Surgical Therapies forVitiligo.DermatolClin.2017 Apr；35(2):193-203.doi:10.1016/j.det.2016.11.009.PMID:28317528.)；但使用藥物治療和光療的病人病情易復發，并且長期療效不佳，手術治療有創傷性且不能解決大面積疾病患者的問題，因此需要開發更有效的新型白癜風治療方法(Bishnoi A,Parsad D.Clinical and Molecular Aspects ofVitiligo Treatments.Int J Mol Sci.2018 May 18；19(5):1509.doi:10.3390/ijms19051509.PMID:29783663；PMCID:PMC5983813.)。