[發(fā)明專利]基于ISSR指紋圖譜系統(tǒng)鑒別常見菜用黃麻品種的方法及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110776747.6
• 申請日: 2021-07-09
• 公開（公告）號: CN113278727A
• 公開（公告）日: 2021-08-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 廖小芳;趙艷紅;侯文煥;唐興富
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895
• 代理公司: 鄭州優(yōu)盾知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 41125
• 代理人: 冉珊敏

1.基于ISSR指紋圖譜系統(tǒng)鑒別常見菜用黃麻品種的方法，其特征在于，步驟如下：

（1）提取待檢測的菜用黃麻總DNA；

（2）以步驟（1）的黃麻總DNA為模板，依次以ISSR引物鑒別組中的1號、2號、3號引物為ISSR引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增；

（3）分析步驟（2）PCR擴(kuò)增后的條帶，根據(jù)常見菜用黃麻品種的ISSR引物鑒別組中的每條引物呈現(xiàn)的條帶信息建立DNA指紋圖譜，鑒定待測菜用黃麻的品種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述常見菜用黃麻品種為桂麻菜1號、桂麻菜2號、桂麻菜3號、桂麻菜4號和桂麻菜5號。

3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所述步驟（2）中ISSR引物鑒別組中的1號、2號、3號引物分別為UBC814、UBC854和UBC872或UBC814、UBC854和UBC874或UBC814、UBC854和UBC878；UBC814序列為5'-CTCTCTCTCTCTCTCTA-3'、UBC854序列為5'-TCTCTCTCTCTCTCTCRG-3'、UBC872序列為5'- GATAGA TAGATAGATA-3'、UBC874序列為5'-CCCTCCCTCCCTCCCT-3'、UBC878序列為5'- GGATGGATGGA TGGAT-3'，其中R = (A , G)。

4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（2）中PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?4℃預(yù)變3 min，94℃ 30 s，56℃ 20 s，72℃ 20 s，擴(kuò)增35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸3 min。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟（3）中DNA指紋圖譜的構(gòu)建方法為：以常見菜用黃麻品種編號和擴(kuò)增譜帶帶型為縱列，每條譜帶的位點(diǎn)編號為橫行，在每一縱橫交結(jié)處，有擴(kuò)增譜帶用“1”表示，沒有擴(kuò)增譜帶用“0”表示，分別獲得每條引物對不同菜用黃麻品種的ISSR指紋圖譜表。

6.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的方法在鑒定菜用黃麻種質(zhì)資源中的應(yīng)用。