[發明專利]一種酶標抗體保護液

在審

• 申請號: 202110759803.5
• 申請日: 2021-07-05
• 公開（公告）號: CN113567661A
• 公開（公告）日: 2021-10-29
• 發明（設計）人: 張恒;張世偉;馮榮虎;林霖;勞翠瑜;朱成杰;王坤;王珍妮
• 申請（專利權）人: 深圳市計量質量檢測研究院（國家高新技術計量站;國家數字電子產品質量監督檢驗中心）
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 盧澤明

本發明涉及酶聯免疫檢測試劑技術領域，公開了一種酶標抗體保護液，包括以下成分：唾液酸糖蛋白(來源于燕窩)、明膠(來源于牛)、Procline 200、Triton X－100、聚乙烯吡咯烷酮，并用0.1M的磷酸緩沖液調節pH＝7.4。本發明的酶標抗體保護液，采用來源于燕窩的唾液酸糖蛋白作為保護蛋白，唾液酸糖蛋白是一種保水性良好的蛋白，對抗體和酶均由良好的保護作用，并且該蛋白來自于金絲雀唾液，不含有免疫球蛋白，以解決現有的酶標抗體保護溶液因自身含有免疫球蛋白導致的無法適用于含有免疫球蛋白的酶聯免疫分析或以免疫球蛋白為檢測對象的酶聯免疫分析。

技術領域

本發明涉及酶聯免疫檢測試劑技術領域，特別是涉及一種酶標抗體保護液。

背景技術

在酶聯免疫檢測試劑盒生產中，需要使用保護溶液對抗體和酶標抗體進行保護，以使商品化試劑盒擁有更長的貨架期。目前的保護溶液對酶標抗體的保護期一般為1年，無法適應長時間保存的要求。并且因為其中含有由蛋白成分帶入的免疫球蛋白，如傳統的酶標抗體保護液含有牛血清白蛋白，卵白蛋白，乳蛋白等蛋白，不可避免的代入IgG，IgY等免疫球蛋白，給一些對免疫球蛋白林敏的免疫檢測實驗帶來背景值，導致酶聯免疫檢測試劑盒無法適用于一些特殊的酶聯免疫分析，如以免疫球蛋白為檢測對象的免疫分析，或者背景干擾要求較高的免疫分析。此外，傳統的酶標抗體保護液還含有蔗糖、果糖、海藻糖等小分子糖類，對免疫檢測帶來一定的干擾。

發明內容

本發明要解決的技術問題是：現有的保護溶液無法長時間保存，以及無法適用于含有免疫球蛋白的酶聯免疫分析或者以免疫球蛋白為監測對象的酶聯免疫分析。

為了解決上述技術問題，本發明提供了一種酶標抗體保護液，包括以下成分：唾液酸糖蛋白(來源于燕窩)、明膠(來源于牛)、Procline 200、Triton X－100、聚乙烯吡咯烷酮，并用0.1M的磷酸緩沖液調節pH＝7.4。Procline 200在本發明的方案中作為防腐劑，與其他組分共同作用以延長酶標抗體保護液的保護時間。Triton X－100用于增加唾液酸糖蛋白的溶解性。

優選的，唾液酸糖蛋白采用以下步驟制備：10g干燕窩，使用7M尿素浸提20～24小時，離心取上清液，然后使用40Kda截流量透析膜進行透析除去尿素，最后將透析后的產物凍干即得到唾液酸糖蛋白。

優選的，唾液酸糖蛋白的濃度為0.5～3mg/mL，明膠的濃度為1～4mg/mL，Procline200的濃度為2.5～6mg/mL，Triton X－100的濃度為2.5～6mg/mL，聚乙烯吡咯烷酮的濃度為3～6mg/mL。

優選的，唾液酸糖蛋白的濃度為1mg/mL，明膠濃度為2mg/mL，Procline 200濃度為5mg/mL，Triton X－100的濃度為5mg/mL，聚乙烯吡咯烷酮的濃度為5mg/mL。

優選的，磷酸緩沖液包括以下含量的組分：0.1mol/L的磷酸氫二鈉(Na₂HPO₄)、0.1mol/L的磷酸二氫鈉(NaH₂PO₄)，其中磷酸氫二鈉與磷酸二氫鈉的體積比為80～83：17～20，使用0.1M的NaOH或者HCl調節pH至7.4。

與現有技術相比，本發明具有以下優點：

1、本發明的酶標抗體保護液，采用來源于燕窩的唾液酸糖蛋白作為保護蛋白，唾液酸糖蛋白是一種保水性良好的蛋白，對抗體和酶均有良好的保護作用，并且該蛋白來自于金絲雀唾液，不含有免疫球蛋白，以解決現有的酶標抗體保護溶液因自身含有免疫球蛋白導致的無法適用于含有免疫球蛋白的酶聯免疫分析或以免疫球蛋白為檢測對象的酶聯免疫分析；

2、本發明的酶標抗體保護液，采用高糖基化(糖蛋白中糖的比例約為40％)的唾液酸糖蛋白作為酶標抗體保護蛋白，其中的糖類與蛋白以結合態的形式存在于保護液中，不會對酶聯免疫檢測造成干擾；