[發明專利]一種無刺蜂蜂蜜中海藻酮糖的分離和檢測方法

在審

• 申請號: 202110731869.3
• 申請日: 2021-06-30
• 公開（公告）號: CN113176360A
• 公開（公告）日: 2021-07-27
• 發明（設計）人: 薛曉鋒;鄭星;王凱;吳黎明;彭文君
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蜜蜂研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/74
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 喬鳳杰

本發明屬于蜂蜜中有效成分的檢測領域，具體涉及一種無刺蜂蜂蜜中海藻酮糖的檢測方法。本發明所述方法包括通過液相色譜對待檢測的無刺蜂蜂蜜中的海藻酮糖進行分離的操作；所述液相色譜分離的過程中選擇Hi?Plex Pb色譜柱。本發明首次實現了無刺蜂蜂蜜中海藻酮糖的分離，且該方法簡單、快捷，有利于后續進行海藻酮糖的大規模提取和應用。

技術領域

本發明屬于蜂蜜中有效成分的檢測領域，具體涉及一種無刺蜂蜂蜜中海藻酮糖的檢測方法。

背景技術

無刺蜂（Stingless bees）屬于膜翅目（Hymenoptera）、蜜蜂科（Apidae）、麥蜂族（Meliponini）昆蟲，由于尾部蟄針退化，被名為無刺蜂，主要生活在熱帶和亞熱帶地區，分布于中國的臺灣省、云南和海南等熱帶地區。無刺蜂身材小，飛行能力較低，是小型植物的主要授粉者，它可采集巢穴周圍開花的汁液、植物或昆蟲分泌物，并儲存于用蜂膠和蜂蠟的混合物制成的球型罐中，即為無刺蜂蜂蜜。研究發現無刺蜂蜂蜜中含有豐富的營養成分，如多酚類化合物等，具有顯著的藥理活性和藥用價值，例如抗氧化、消炎、抑菌、促進傷口愈合、抗糖尿病、治療眼部疾病、調節機體代謝、調節腸道菌群等，因此會被認為是一種重要的保健食品，越來越受消費者的喜愛。無刺蜂蜂蜜的口感酸甜，水分含量較高，主要由糖類組成，約占其干重碳水化合物的95%-97%。

海藻酮糖(Trehalulose, α-D-glucopyranosyl-1,1-D-fructose)是一種還原性二糖，極少量存在于天然普通蜂蜜中，難以用化學合成，只有某些微生物可以轉化蔗糖(sucrose, α-D-glucopyranosyl-1,2-D-fructofuranose)的結構，生成異麥芽酮糖(isomaltulose/palatinose, α‐D‐glucopyranosyl‐1,6‐D‐fructofuranose)和海藻酮糖^[26]。這些蔗糖異構體比蔗糖具有更高的酸穩定性，在某種程度上可以增加物種的競爭優勢?？紤]到蔗糖異構體還沒有副作用的報導，這些化合物可能是理想的蔗糖替代品。異麥芽酮糖的甜度為蔗糖的30%，易于結晶并用作固體添加劑；但海藻酮糖的甜度是蔗糖的60%，具有高度水溶性，可作為填充劑、保濕劑和質地增強劑，適合用于果凍和果醬等高甜食品加工。海藻酮糖的消化吸收慢于蔗糖，會降低單糖和胰島素釋放到血液中的速率，可用于糖尿病患者的食品和飲料；并且海藻酮糖不作為能引起齲齒的變形鏈球菌的葡萄糖基轉移酶的底物，可抑制變形鏈球菌對玻璃表面的蔗糖依賴粘附性，顯著降低齲齒病，防止蛀牙。除了作為食品成分的優點外，海藻酮糖的還原性使其成為良好的化學修飾前體，并且還被用于制作糖醇，作為低熱量的甜味劑和生物相容性聚合物。海藻酮糖具有優秀的生物學功能，然而目前還未針對我國無刺蜂蜂蜜中海藻酮糖的操作步驟簡單的檢測方法。

發明內容

針對現有技術中存在的技術問題，本發明提供一種簡單的檢測無刺蜂蜂蜜中海藻酮糖的方法。

本發明所述方法包括以通過液相色譜對待檢測的無刺蜂蜂蜜中的海藻酮糖進行分離的操作；所述液相色譜分離的過程中選擇Hi-Plex Pb色譜柱。

海藻酮糖是一種二糖，與蜂蜜中常見的其他成分如蔗糖、麥芽糖等的性質十分接近，因此分離存在非常大的難度，本發明發現選擇上述色譜柱可實現對海藻酮糖的理想分離，分離操作簡單快捷，分離效果好，可為后續地檢測奠定良好的基礎。

本發明所述海藻酮糖的結構式為：

優選的，所述液相色譜分離的過程中，以水作為流動相。選擇Hi-Plex Pb色譜柱，以水作為流動相即可實現海藻酮糖與其他成分的有效分離，使用其他有機溶劑分離效果不好。

優選的，所述液相色譜分離的過程中，柱溫為45~55 ℃。