[發明專利]一種檢測新型冠狀病毒的時間分辨熒光免疫試劑盒及其制備方法

有效

• 申請號: 202110722998.6
• 申請日: 2021-06-28
• 公開（公告）號: CN113215107B
• 公開（公告）日: 2022-01-14
• 發明（設計）人: 宋旭東;徐部灼;羅樹紅;黃若磐
• 申請（專利權）人: 瑞博奧（廣州）生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/10;G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/58
• 代理公司: 廣州廣典知識產權代理事務所(普通合伙) 44365
• 代理人: 萬志香;曾銀鳳

1.一種新型冠狀病毒檢測試紙條，其特征在于，所述試紙條包括底板以及沿所述底板的長度方向順次粘覆于所述底板上的樣品墊、包被膜和吸水紙；

其中，所述樣品墊上噴有標記抗體，所述標記抗體為熒光微球標記鼠抗新型冠狀病毒S1-RBD蛋白單克隆抗體和熒光微球標記的兔IgG抗體，所述包被膜上設置有相間隔的由山羊抗兔IgG抗體包被形成的質控線和由單克隆抗體包被形成的檢測線；或，所述樣品墊上噴有標記抗體，所述標記抗體為熒光微球標記的單克隆抗體和熒光微球標記的兔IgG抗體，所述包被膜上設置有相間隔的由山羊抗兔IgG抗體包被形成的質控線和由鼠抗新型冠狀病毒S1-RBD蛋白單克隆抗體包被形成的檢測線；

所述單克隆抗體是由雜交瘤細胞株COVID19-SRBD-8分泌產生，所述細胞株的保藏編號為CCTCC No：C202167；

所述鼠抗新型冠狀病毒S1-RBD蛋白單克隆抗體為Raybiotech. Life .Inc的cat#130-10815。

2.根據權利要求1所述新型冠狀病毒檢測試紙條，其特征在于，所述質控線靠近所述樣品墊，所述檢測線靠近所述吸水紙。

3.根據權利要求1所述新型冠狀病毒檢測試紙條，其特征在于，所述標記抗體由標記抗體稀釋液稀釋，所述標記抗體稀釋液包括：0.1M~0.3M NaH₂PO₄，0.1M~0.3MNa₂HPO₄，10%~30%海藻糖，1%~5%BSA，0.1%~2%酪蛋白，0.1%~1%TWEEN-20，0.1%~1%proclin300。

4.根據權利要求1所述新型冠狀病毒檢測試紙條，其特征在于，所述熒光微球為Eu³⁺鑭系元素熒光微球，所述熒光微球的直徑為290nm-350nm。

5.根據權利要求1所述新型冠狀病毒檢測試紙條，其特征在于，所述熒光微球標記的鼠抗新型冠狀病毒S1-RBD蛋白單克隆抗體濃度為0.1mg/ml-0.2mg/ml，所述熒光微球標記的兔IgG抗體濃度為0.05mg/ml-0.1mg/ml；所述熒光微球標記的鼠抗新型冠狀病毒S1-RBD蛋白單克隆抗體和兔IgG抗體溶液按每30cm×2.9cm噴涂300μl-600μl至樣品墊上。

6.根據權利要求1所述新型冠狀病毒檢測試紙條，其特征在于，所述檢測線或所述質控線上包被的抗體由包被抗體稀釋液稀釋，所述包被抗體稀釋液包括質量百分比為0.1%-1.8%NaCl，0.01%-0.05%KCl，0.01%-0.3%NaHPO₄，0.01%-0.05%KH₂PO₄，1%-5%海藻糖，5%-15%蔗糖和0.01%-0.3%proclin300。

7.根據權利要求1-6任一項所述新型冠狀病毒檢測試紙條，其特征在于，所述檢測線包被的所述單克隆抗體的濃度為1mg/ml-2mg/ml，按30μl-50μl/30cm劃線至包被膜上；

所述質控線包被的山羊抗兔IgG抗體的濃度為0.1mg/ml-0.5mg/ml，按30μl-50μl/30cm劃線至包被膜上。

8.一種SARS-CoV-2S1-RBD抗原檢測試劑盒，其特征在于，包括權利要求1-7任一項所述新型冠狀病毒檢測試紙條。

9.根據權利要求8所述SARS-CoV-2S1-RBD抗原檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括樣品稀釋液，所述樣品稀釋液，每800ml中包括8g-10g Na₂HPO₄、1g-3g NaH₂PO₄·2H₂O、6g-8g NaCl、1g-3g酪蛋白和0.1ml-2ml Proclin300。