[發(fā)明專利]一種小規(guī)模化生產(chǎn)富硒荷葉離褶傘菌絲體的方法及應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110714460.0
• 申請(qǐng)日: 2021-06-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113403206A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高慧娟;王雪梅;魏生龍;梁倩倩;王曉琴
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河西學(xué)院
• 主分類號(hào): C12N1/14
• 分類號(hào): C12N1/14;A23L31/00;A23L33/00;A61K8/99;A61K36/06;A61P3/06;A61P3/10;A61P39/06;A61Q19/00;A61Q19/08;C12R1/645
• 代理公司: 北京盛凡智榮知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11616
• 代理人: 汪麗麗

本發(fā)明公開(kāi)了一種小規(guī)模化生產(chǎn)富硒荷葉離褶傘菌絲體的方法及應(yīng)用，涉及微生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明是利用蛋白水解液、玉米淀粉水解液、葡萄糖作為發(fā)酵培養(yǎng)基，并在發(fā)酵培養(yǎng)基中接種荷葉離褶傘種子培養(yǎng)液，在培養(yǎng)過(guò)程中加入滅菌Na₂SeO₃溶液，并調(diào)整培養(yǎng)參數(shù)，從而獲得富硒量更高的荷葉離褶傘菌絲體。本發(fā)明大大提高菌絲體產(chǎn)量，且富硒荷葉離褶傘菌絲體可以在20L生物發(fā)酵罐內(nèi)進(jìn)行連續(xù)化生產(chǎn)，產(chǎn)品批次穩(wěn)定高。本發(fā)明所生產(chǎn)的富硒荷葉離褶傘菌絲體可以制備降血脂、降血糖及抗氧化的功能性食品、藥物或化妝品。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種小規(guī)模化生產(chǎn)富硒荷葉離褶傘菌絲體的方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)

硒作為人體必需的微量元素，能激發(fā)人體免疫球蛋白及抗體的產(chǎn)生，具有抗衰老作用。荷葉離褶傘為離褶傘屬真菌，具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。荷葉離褶傘因具有較強(qiáng)的富硒能力，使無(wú)機(jī)硒安全有效地轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒多糖和硒蛋白，大大提高食用菌的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和應(yīng)用范圍。

目前對(duì)荷葉離褶傘進(jìn)行人工富硒培養(yǎng)的規(guī)模化技術(shù)還不很成熟，如何實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)富硒荷葉離褶傘菌絲體的方法是目前行業(yè)一直不斷探索的重要課題。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種小規(guī)模化生產(chǎn)富硒荷葉離褶傘菌絲體的方法，該方法可以在20L發(fā)酵罐中生產(chǎn)富硒荷葉離褶傘菌絲體，且制備過(guò)程操作簡(jiǎn)便且所獲得的菌絲體批次穩(wěn)定性高，具有較高的生物活性。

本發(fā)明小規(guī)模化生產(chǎn)富硒荷葉離褶傘菌絲體的方法，包括以下步驟：

S1、制備荷葉離褶傘種子培養(yǎng)液：在250mL三角瓶中，加入100mL的加富PDA培養(yǎng)基，接入活化的荷葉離褶傘菌種，搖床培養(yǎng)4-8d，得到荷葉離褶傘種子培養(yǎng)液，置于4℃冰箱備用；

S2、制備發(fā)酵培養(yǎng)基，所述發(fā)酵培養(yǎng)基是由蛋白水解液、玉米淀粉水解液、和葡萄糖經(jīng)滅菌后制備而成；

S3、接種荷葉離褶傘種子：在所述發(fā)酵培養(yǎng)基中接種步驟S1所述荷葉離褶傘種子培養(yǎng)液，接種量為5.5～10％；通入無(wú)菌空氣，并在罐內(nèi)壓強(qiáng)為0.02MPa的條件下進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)；

S4、無(wú)菌培養(yǎng)第3d，在發(fā)酵培養(yǎng)基中加入滅菌Na₂SeO₃溶液，使每1mL發(fā)酵培養(yǎng)基中含有4μg Na₂SeO₃，繼續(xù)發(fā)酵5-10d；

S5、發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵液經(jīng)300目濾網(wǎng)過(guò)濾，蒸餾水反復(fù)洗滌菌球后進(jìn)行冷凍干燥，稱重即得富硒荷葉離褶傘菌絲體菌絲體。

優(yōu)選地，本發(fā)明步驟S1所述的搖床培養(yǎng)時(shí)間為5d。

優(yōu)選地，所述蛋白水解液的制備方法如下：稱取黃豆100g，浸泡過(guò)夜后打漿，將其煮沸并降溫處理，再加入5wt％的蛋白酶，并在40℃恒溫水浴鍋中水浴5h，制得蛋白水解液。

更優(yōu)選地，所述將煮沸后的黃豆?jié){降溫至40℃后再加入蛋白酶。

優(yōu)選地，所述玉米淀粉水解液的制備方法如下：稱取玉米面600g，并加入65℃熱水6000g，再加入5wt％的淀粉酶，置于65℃恒溫水浴鍋中混合至遇碘液無(wú)色為止，得到玉米淀粉水解液。

優(yōu)選地，步驟S2所述的滅菌溫度為121℃，滅菌時(shí)間為40min。

優(yōu)選地，本發(fā)明步驟S5所述的干燥溫度為-25℃～15℃。

本發(fā)明的另一目的是提供了一種抗氧化能力強(qiáng)且具有降血脂、降血糖的富硒荷葉離褶傘菌絲體，并利用其制成降血脂、降血糖及抗氧化的功能性食品，藥物或者化妝品。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：