[發明專利]一種大鯢低聚肽及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110707112.0
• 申請日: 2021-06-24
• 公開（公告）號: CN113637717B
• 公開（公告）日: 2023-09-08
• 發明（設計）人: 肖慰南;賈紹輝
• 申請（專利權）人: 山東裕盛生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/36;A61K38/01;A61P3/04;A61P3/06
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 于曉曉

本發明涉及大鯢肽技術領域，具體涉及一種大鯢低聚肽及其制備方法和應用，所述制備方法包括大鯢蛋白提取；大鯢蛋白酶解：將上述所得脫脂大鯢粉加水攪拌，然后加入復合酶進行酶解，酶解條件為：pH值7.2～7.5，酶解溫度50～60℃，酶解時間5～7小時，酶解完成后升溫至90～110℃隨后使復合水解酶滅活；以及大鯢肽分離純化：將所得酶解產物經過截留1000道爾頓分子量的可再生纖維素透析膜進行過濾，收集濾液，濾液經過疏水柱進一步分離得分離液，分離液冷凍干燥得大鯢低聚肽；所得的大鯢低聚肽，能夠降低體重、調節血脂，顯著性減少肥胖模型鼠食欲，減少血清中甘油三脂、總膽固醇及提高低密度脂蛋白蛋白的含量。

技術領域

本發明涉及大鯢肽技術領域，具體涉及一種大鯢低聚肽及其制備方法和應用。

背景技術

肥胖是指一定程度的明顯超重與脂肪層過厚，是體內脂肪，尤其是甘油三酯積聚過多而導致的一種狀態。由于食物攝入過多或機體代謝的改變而導致體內脂肪積聚過多造成體重過度增長并引起人體病理、生理改變或潛伏，因此如何遏制肥胖的發生顯得刻不容緩。營養控制結合運動干預被認為是最有效的減肥手段，目前市面上還缺乏一款真正具有減肥效果而且安全有效的減肥產品。

大鯢又稱娃娃魚，是一種高營養價值兩棲類動物，被譽為“水中人參”，大鯢的雞肉、皮膚、內臟等含有豐富的蛋白質、氨基酸、脂肪酸及微量元素等，對大鯢蛋白質進行深加工，可以獲得一系列有益于人類生命活動的大鯢生物活性肽。目前，大鯢生物活性肽多是以大鯢的肌肉、皮膚、內臟、脂肪、血液等為原料，其制備方法主要包括酸水解、堿水解和酶解法，但對于特定功能活性肽少有關注。近幾年，已有相關報道公開了大鯢肽的制備方法以及功效，其功效初抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、降血壓、修復胃粘膜、骨骼和韌帶保健、護發防脫等生理活性功能外，大鯢膠原蛋白肽還具有修復上皮細胞、促進傷口愈合、保護肝臟損傷、增強免疫力的特殊功效。目前也有相關研究以獲得具有降脂功能的大鯢膠原蛋白肽為目標，嘗試了大量大鯢膠原肽的蛋白酶解方法，但依然難以獲得調脂減肥功效理想的大鯢膠原肽。

發明內容

針對現有技術中存在的問題，本發明提供一種大鯢低聚肽及其制備方法和應用，通過酶解和分離純化步驟得到分子量小于1000道爾頓的大鯢低聚肽，具有顯著的調脂減肥效果。

本發明提供一種大鯢低聚肽的制備方法，包括如下步驟：

(1)大鯢蛋白提取

將新鮮大鯢肉粉碎、勻漿、冷凍離心后經冷凍干燥處理，然后將其粉碎至60目以下得大鯢肉粉；浸提去除脂肪，揮干溶劑，得到脫脂大鯢粉；

(2)大鯢蛋白酶解

將上述所得脫脂大鯢粉加水攪拌，然后加入復合酶進行酶解，酶解條件為：pH值7.2～7.5，酶解溫度50～60℃，酶解時間5～7小時，酶解完成后升溫至90～110℃隨后使復合水解酶滅活；

(3)大鯢肽分離純化

將步驟(2)所得酶解產物經過截留1000道爾頓分子量的可再生纖維素透析膜進行過濾，收集濾液，濾液經過疏水柱進一步分離得分離液，分離液冷凍干燥得大鯢低聚肽。

優選的，步驟(1)冷凍離心過程為于溫度為3～5℃、轉速為1000～1200r/min條件下冷凍離心10～30min。

優選的，步驟(1)中冷凍干燥過程為于溫度為-20℃～-45℃，壓力為25～30Pa條件下冷凍干燥24～36h。冷凍干燥可避免干燥過程中蛋白的降解以及結構改變，能夠最大程度地保持蛋白的活性。

優選的，步驟(1)中浸提過程中所用浸提劑為食品級別正己烷。

優選的，步驟(2)中大鯢粉與水的質量體積比為1:3～15。