[發明專利]用于檢測COVID-19易感性的分子標記、試劑盒及應用

有效

• 申請號: 202110700484.0
• 申請日: 2021-06-23
• 公開（公告）號: CN113493863B
• 公開（公告）日: 2022-06-10
• 發明（設計）人: 馬丁;吳鵬;丁文成;鄔堂春;王超龍;劉晨
• 申請（專利權）人: 華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 胡鎮西;程杰

本發明公開了一種用于檢測COVID?19易感性的分子標記、試劑盒及應用，屬于分子生物和醫學技術領域。該分子標記包括在MEF2B基因序列的第1010位存在一個SNP位點，其中，脫氧核苷酸由C變為G。該檢測體外樣品是否存在MEF2B基因的單核苷酸多態性的方法，包括如下步驟，(1)采用特異性引物SEQ ID No：2和SEQ ID No：3擴增樣品的MEF2B基因，得到擴增產物；(2)對步驟(1)的擴增產物進行序列測定，當MEF2B基因序列的第1010位存在一個SNP位點，且脫氧核苷酸由C變為G時，則為突變MEF2B基因，仍是C時為正常基因。本發明通過檢測體外樣品中是否含有MEF2B基因單核苷酸多態性，能夠實現對于COVID?19高危人群及易感人群的早期診斷、篩查和對于COVID?19的有效防控。

技術領域

本發明涉及基因的單核苷酸多態性(single nucleotide polymorphism,SNP)及其與COVID-19的相關性研究，屬于分子生物 學和醫學技術領域，具體地涉及一種用于檢測COVID-19易感性的分 子標記、試劑盒及應用。

背景技術

據數據模型研究和血清感染研究估計實際感染人數要大得多，表 明大多數感染者可能有輕度癥狀或無癥狀。COVID-19患者表現出廣 泛的臨床癥狀：在確診病例中，多達5％會發展成為包含急性呼吸窘 迫綜合征(ARDS)在內的嚴重肺炎。雖然目前研究已發現高齡、男性、 高血壓、糖尿病、肥胖和心血管疾病等因素與COVID-19的發病密切 相關，但仍有大量沒有上述危險因素的患者出現嚴重癥狀。提示 COVID-19患者的篩選、早期診斷對于疫情防治具有重要意義，因此， 尋找和鑒定COVID-19高危人群和易感個體至關重要。

然而現有技術中，沒有與COVID-19易感性相關的遺傳變異的報 道，也沒有相關的檢測試劑盒和檢測方法。因此，本領域急需進一步 尋找COVID-19易感性基因，開發檢測COVID-19高危人群和易感個 體的方法、試劑盒以及相關的治療藥物。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明公開了一種用于檢測COVID-19易 感性的分子標記、試劑盒及應用。具體地通過檢測體外樣品中是否含 有MEF2B基因中的單核苷酸多態性，能夠實現對于COVID-19高危 人群及易感人群的早期診斷、篩查和對于COVID-19的有效防控。

為實現上述目的，本發明公開了一種用于檢測COVID-19易感性 的分子標記，它包括如下SNP位點：在MEF2B基因序列的第1010 位存在一個SNP位點，其中，脫氧核苷酸由C變為G。

本發明公開技術方案的其中一個技術目的是上述分子標記在制 備用于檢測COVID-19易感性的試劑盒中的應用。

進一步地，一種用于檢測COVID-19易感性的試劑盒，所述試劑 盒包括SEQ ID No：2和SEQ ID No：3所示的用于擴增MEF2B基因 的特異性引物。

進一步地，所述試劑盒還包括PCR反應液，所述PCR反應液由 Taq酶、Buffer、dNTP、Mg²⁺和雙蒸水組成。

進一步地，所述特異性引物對MEF2B基因擴增后所得產物長度 為250～2010bp。

本發明公開技術方案的另一個技術目的是一種檢測體外樣品是 否存在基因單核苷酸多態性的方法，它包括如下檢測過程：

采用特異性引物SEQ ID No：2和SEQ ID No：3擴增樣品的 MEF2B基因，得到擴增產物，對所述擴增產物進行序列測定，當 MEF2B基因序列的第1010位存在一個SNP位點，且脫氧核苷酸由C 變為G時，則為突變MEF2B基因，仍是C時為正常基因。

進一步地，采用PCR擴增技術對樣品進行擴增，且PCR擴增條 件為，94℃:4分鐘，94℃:30秒×35次循環，60℃:30秒×35次循環， 72℃:1分鐘×35次循環，72℃延伸5分鐘。