[發明專利]一種古代經典名方復方制劑蠲痹顆粒薄層鑒別及總黃酮含量測定的方法

在審

• 申請號: 202110695557.1
• 申請日: 2021-06-25
• 公開（公告）號: CN113325125A
• 公開（公告）日: 2021-08-31
• 發明（設計）人: 羅宇東;譚安薔;龐曉云;陳曉藝;李娜;鄒意華;李清平
• 申請（專利權）人: 廣西中醫藥大學制藥廠
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N21/31
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1.一種古代經典名方復方制劑蠲痹顆粒薄層鑒別及總黃酮含量測定的方法，其特征在于：該方法利用薄層鑒別(TLC)及紫外分光光度法，分別鑒別蠲痹顆粒中的羌活、獨活、秦艽，對活性大類成分總黃酮進行含量測定。具體步驟如下：(1)薄層鑒別：A羌活：精密稱取羌活對照藥材1.0g置具塞錐形瓶中，加入20ml石油醚(60～90℃)，超聲提取30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加入1ml乙酸乙酯溶解，作為羌活對照藥材溶液；精密取蠲痹顆粒樣品粉末稱取2.0g，同對照藥材溶液制備方法，制備供試品溶液；取缺羌活的的陰性樣品，同對照藥材制備的方法，制成羌活陰性對照溶液。精密吸取供試品溶液、陰性樣品溶液和羌活對照藥材溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯(8:2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，與對照藥材色譜相應位置上顯相同顏色的斑點。B獨活：精密稱取獨活對照藥材1.0g，加入20ml石油醚(60～90℃)，超聲提取30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml溶解，作為獨活對照藥材溶液；精密稱取蠲痹顆粒粉末2.0g，同對照藥材溶液制備方法，制備供試品溶液。取缺獨活的陰性樣品,同對照藥材溶液制備方法,制成獨活陰性對照溶液。精密吸取供試品溶液、獨活對照藥材溶液和陰性樣品溶液各5μl，分別同一硅膠G板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(7:3)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈光(365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。C秦艽：精密稱取秦艽對照藥材1.0g，加甲醇20ml，超聲波提取30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml溶解，作為秦艽對照藥材溶液。精密稱取蠲痹顆粒樣品2.0g，同秦艽對照藥材溶液制備方法，制備供試品溶液。取缺秦艽的陰性樣品,同對照藥材溶液制備方法,制成秦艽的陰性對照溶液。精密吸取供試品溶液、秦艽對照藥材溶液和陰性樣品溶液各10μl，分別點于同一塊硅膠GF254板上，以三氯甲烷-甲醇-水(8:2:0.1)為展開劑，展開，取出，晾干在紫外線燈(254nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(2)總黃酮含量測定：A對照品溶液的制備：精密稱取蘆丁對照品適量，置于25ml容量瓶中，加無水乙醇溶解并定容至刻度線，搖勻，制備濃度為0.519mg·ml^-1蘆丁對照品溶液。B供試品溶液的制備：取蠲痹顆粒細粉約3.0g，精密稱定，置于索氏提取器中，加入三氯甲烷加熱回流提取至無色，棄去三氯甲烷溶液，藥渣揮去三氯甲烷，加甲醇繼續提取至無色(約3h)，提取液揮干，殘渣加乙醇，溶解，置25ml容量瓶中，加乙醇至刻度線，搖勻，作為供試品溶液。C分離檢測：精密移取蘆丁對照品溶液0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml，分別置于25ml容量瓶中，按順序加水至6ml，加5％NaNO₂溶液1.0ml，搖勻，放置6min，加10％AlCl₃溶液1.0ml，搖勻，放置6min，加4％NaOH溶液10.0ml，再加水至刻度。搖勻，放置15min，以相應試劑為空白，在波長為510nm處進行檢測，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線；精密吸取樣品溶液1ml,置于25ml容量瓶中，按順序加水至6ml，加5％NaNO₂溶液1.0ml，搖勻，放置6min，加10％AlCl₃溶液1.0ml，搖勻，放置6min，加4％NaOH溶液10.0ml，再加水至刻度。搖勻，放置15min，在波長為510nm處進行檢測，記錄吸光值，根據標準曲線計算含量即可。