[發(fā)明專利]一種提升昆蟲藥代動(dòng)力學(xué)準(zhǔn)確性的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110651869.2
• 申請(qǐng)日: 2021-06-11
• 公開（公告）號(hào): CN113433310B
• 公開（公告）日: 2023-04-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊云秋;張晨;姜睿;周曉敏;趙玉;沈娟;龍雁華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/50
• 分類號(hào): G01N33/50
• 代理公司: 哈爾濱市陽(yáng)光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 趙巧娜

本發(fā)明公開了一種提升昆蟲藥代動(dòng)力學(xué)準(zhǔn)確性的方法，屬于生物技術(shù)域。本發(fā)明以昆蟲為對(duì)象，首次通過(guò)微量注射的方法，研究了昆蟲藥代動(dòng)力學(xué)，具體為選取注入蟲體的長(zhǎng)度不超過(guò)1mm的進(jìn)樣器針頭，注入的位置介于昆蟲表皮和昆蟲腸道之間，直腸和回腸之間，在不破壞昆蟲腸道及其他器官的情況下，能夠更準(zhǔn)確的研究藥品代謝情況；本發(fā)明的注射方法不涉及過(guò)多的設(shè)備及復(fù)雜的步驟，操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，準(zhǔn)確率高，為生物醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的相關(guān)研究提供了有力的技術(shù)支撐。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明一種提升昆蟲藥代動(dòng)力學(xué)準(zhǔn)確性的方法，屬于生物技術(shù)域。

背景技術(shù)

在昆蟲與寄主相互適應(yīng)的研究中，經(jīng)常會(huì)涉及昆蟲對(duì)寄主次生代謝物的適應(yīng)能力研究，常用的研究方法是采用喂食方法將化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入到昆蟲體內(nèi)分析其在昆蟲體內(nèi)的代謝情況。該方法具有很多弊端，比如由于昆蟲自由取食所以不能達(dá)到取食量完全一致，而且取食時(shí)間也不能人工控制，從而導(dǎo)致對(duì)于這些化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入昆蟲體內(nèi)的量和時(shí)長(zhǎng)不能統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，從而對(duì)準(zhǔn)確研究昆蟲與寄主相互適應(yīng)帶來(lái)困難和問(wèn)題；另外我們現(xiàn)在對(duì)次生代謝物的分析研究主要是了解其通過(guò)昆蟲代謝后的最終情況，而對(duì)其代謝的過(guò)程中量的變化并沒(méi)有很好的方法進(jìn)行研究。

發(fā)明內(nèi)容

目前所公開的微量注射技術(shù)多為針對(duì)細(xì)胞或大中型動(dòng)植物，或極小的粉虱類且多用于研究基因干擾等方向。暫時(shí)還沒(méi)有利用藥代動(dòng)力學(xué)方法研究鱗翅目類昆蟲的顯微注射技術(shù)。因而，本發(fā)明提供了一種提升昆蟲藥代動(dòng)力學(xué)準(zhǔn)確性的方法，以研究化學(xué)物質(zhì)在昆蟲體內(nèi)的吸收，分布，代謝和排泄特征的整個(gè)過(guò)程。

本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)中昆蟲注射技術(shù)的不足，提供一種利用微量注射研究昆蟲藥代動(dòng)力學(xué)的方法。

本發(fā)明提供了一種微量注射昆蟲的方法，所述方法是將藥物注射至昆蟲的腹足節(jié)間膜處。

在一種實(shí)施方式中，所述方法包括以下步驟：

(1)根據(jù)研究目的選擇藥品以及注射濃度；

(2)選取外徑為0.26～0.5mm的針頭進(jìn)行注射；

(3)麻醉，將昆蟲放置在冷凍解剖臺(tái)上麻醉；

(4)將昆蟲放置在冷凍解剖臺(tái)上，腹部朝上；

(5)將藥品注射至昆蟲的腹足節(jié)間膜處；

(6)將注射了藥品的昆蟲進(jìn)行飼養(yǎng)；

(7)飼養(yǎng)一段時(shí)間后，吸取昆蟲的體液，進(jìn)行檢測(cè)和分析；或飼養(yǎng)一段時(shí)間后，直接將蟲體進(jìn)行檢測(cè)和分析。

在一種實(shí)施方式中，選取外徑為0.26mm的針頭進(jìn)行注射。

在一種實(shí)施方式中，將藥品注射至昆蟲的腹足節(jié)間膜處，且不進(jìn)入回腸。

在一種實(shí)施方式中，所述體液取于胸足處。

在一種實(shí)施方式中，所述藥品包括但不限于咖啡堿、化學(xué)殺蟲劑，所述化學(xué)殺蟲劑包括但不限于聯(lián)苯菊酯吡蟲啉、甲基阿維菌素。

在一種實(shí)施方式中，所述昆蟲包括但不限于鱗翅目類昆蟲，所述鱗翅目類昆蟲包括但不限于茶尺蠖、茶蠶、銀尺蠖、草地貪夜蛾。

在一種實(shí)施方式中，當(dāng)昆蟲為茶尺蠖，藥品為咖啡堿時(shí)，根據(jù)蟲體質(zhì)量，每克蟲體注射藥量為0.3～0.5mg。

本發(fā)明提供了一種提升昆蟲藥代動(dòng)力學(xué)準(zhǔn)確性的方法，其特征在于，利用微量注射的方法將藥物注射至昆蟲的腹足節(jié)間膜處，且不進(jìn)入回腸。

在一種實(shí)施方式中，選取外徑為0.26～0.5mm的針頭進(jìn)行注射，將注射了藥物的昆蟲培養(yǎng)一段時(shí)間后，從胸足處吸取體液用于檢測(cè)和分析，或直接將蟲體進(jìn)行檢測(cè)和分析。

在一種實(shí)施方式中，選取外徑為0.26mm的針頭進(jìn)行注射。