[發(fā)明專利]一種刺梨及其制品成分的檢測方法以及刺梨成分?jǐn)?shù)據(jù)庫的建立方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110639729.3
• 申請日: 2021-06-08
• 公開（公告）號: CN113533553B
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孫寶清;徐文流;伍建林;顏冠裕;翁少全;張毅達;鄭佩燕;李詞周;鄭榮波;王宇
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院（廣州呼吸中心）;廣州王老吉大健康產(chǎn)業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 44202
• 代理人: 郝傳鑫;周全英

1.一種刺梨樣品成分的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）對刺梨樣品進行處理，得到供試品溶液；

（2）將供試品溶液注入液相串聯(lián)質(zhì)譜儀中進行檢測；

其中，液相條件如下：色譜柱為C18色譜柱，流動相由流動相A和流動相B組成，流動相A為體積濃度0.05~0.2%的甲酸水溶液，流動相B為體積濃度0.05~0.2%的甲酸乙腈溶液，梯度洗脫，流速0.1~1mL/min，柱溫30~50℃；

質(zhì)譜條件如下：選用電噴霧離子源，正負(fù)離子模式，正離子源參數(shù)：鞘氣體溫度240~260℃，鞘氣流量10~12?L?/?min，輔助氣溫度140~160?℃，輔助氣流量14~16?L/min，噴霧器氣壓23~27?psi，毛細(xì)管電壓3800~4200?V，碰撞能量10-40?eV；負(fù)離子源參數(shù)：鞘氣體溫度310~330?℃，鞘氣流量10~12?L?/?min，輔助氣溫度140~160?℃，輔助氣流量14~16?L?/?min，噴霧器氣壓43~47?psi，毛細(xì)管電壓3300~3700?V，碰撞能量10-40?eV；

所述梯度洗脫程序為：0-5min，流動相B的體積分?jǐn)?shù)由5%變?yōu)?0%；5-10min，流動相B的體積分?jǐn)?shù)由30%變?yōu)?0%；10-11min，流動相B的體積分?jǐn)?shù)由70%變?yōu)?5%；11-12min，流動相B的體積分?jǐn)?shù)保持95%；12-12.1min，流動相B的體積分?jǐn)?shù)由95%變?yōu)?%；12.1-14min，流動相B的體積分?jǐn)?shù)保持5%；

當(dāng)所述刺梨樣品為刺梨時，步驟（1）為：將刺梨全果榨汁后進行固液分離，所得溶液即為供試品溶液，或者步驟（1）為：將刺梨破碎后水提，收集提取液進行濃縮，然后用乙腈水溶液溶解，再固液分離，所得溶液即為供試品溶液；

當(dāng)所述刺梨樣品為刺梨果汁時，步驟（1）為：將刺梨果汁進行固液分離，所得溶液即為供試品溶液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟（2）按照下述液相和質(zhì)譜條件進行檢測：

液相：流動相A為體積濃度0.1%的甲酸水溶液，流動相B為體積濃度0.1%的甲酸乙腈溶液；

質(zhì)譜正離子源參數(shù)：鞘氣體溫度250?℃，鞘氣流量11?L?/?min，輔助氣溫度150?℃，輔助氣流量15?L?/?min，噴霧器氣壓25?psi，毛細(xì)管電壓4000?V，碰撞能量10-40?eV；

質(zhì)譜負(fù)離子源參數(shù)：鞘氣體溫度320?℃，鞘氣流量11?L?/?min，輔助氣溫度150?℃，輔助氣流量15?L?/?min，噴霧器氣壓45?psi，毛細(xì)管電壓3500?V，碰撞能量10-40?eV。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述色譜柱長度為100mm，直徑為2.1mm，填料粒徑為1.7μm。

4.一種刺梨成分?jǐn)?shù)據(jù)庫的建立方法，其特征在于，所述建立方法包括以下步驟：

（S1）按如權(quán)利要求1~3任一項所述的檢測方法對刺梨樣品進行檢測；

（S2）結(jié)合現(xiàn)有數(shù)據(jù)庫和文獻，對步驟（S1）獲得的LC-MS/MS數(shù)據(jù)進行分析以鑒定刺梨樣品的成分，記錄鑒定得出的各成分的分子式、相對保留時間、母離子和子離子數(shù)據(jù)，得到刺梨成分?jǐn)?shù)據(jù)庫。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的建立方法，其特征在于，所述建立方法還包括以下步驟：

對不同的刺梨樣品進行檢測以驗證LC-MS/MS方法及刺梨成分?jǐn)?shù)據(jù)庫的適用性；

呈現(xiàn)驗證后的刺梨成分?jǐn)?shù)據(jù)庫以供用戶進行使用。