[發明專利]一種裝載溶瘤肽的聚合物囊泡及其與囊泡免疫佐劑、PD-1單抗的聯合用藥

有效

• 申請號: 202110626584.3
• 申請日: 2021-06-04
• 公開（公告）號: CN113368053B
• 公開（公告）日: 2023-08-01
• 發明（設計）人: 孟鳳華;夏一楓;鐘志遠
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K38/40;A61K39/395;A61K39/39;A61K47/64;A61P35/00;A61P37/04
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103
• 代理人: 孫周強;陶海鋒

本發明公開了一種裝載溶瘤肽的聚合物囊泡及其與免疫佐劑、抗體的聯合藥物與應用。將聚合物溶液與溶瘤肽溶液混合，然后透析，得到裝載溶瘤肽的聚合物囊泡；將聚合物溶液與免疫佐劑溶液混合，然后透析，得到裝載免疫佐劑的聚合物囊泡。本發明的聯合藥物系統給藥方法能夠有效靶向腫瘤處并重塑腫瘤微環境，在增加腫瘤浸潤T細胞的同時降低發揮免疫抑制作用的Tsubgt;reg/subgt;，從而顯著地增加了IL?6,TNF?α和IFN?γ的含量，并且增加了脾臟中的Tsubgt;CM/subgt;和Tsubgt;EM/subgt;含量，從而實現了強效而長期的免疫記憶。本發明的系統給藥方法能夠明顯地拓寬溶瘤肽和CpG?ODNs的使用窗口，為無法瘤內注射的腫瘤或是轉移性浸潤的腫瘤提供了一種新的治療方案。

技術領域

本發明屬于藥物技術，具體涉及裝載溶瘤肽LTX-315的聚合物囊泡與囊泡CpGODNs佐劑和PD-1抗體的聯合系統遞送用于黑色素瘤的免疫治療。

背景技術

現代生物技術推動了多種多樣的多肽藥物的發展，其中很大一部分在抗癌藥物方面有著出色的潛力。其中，宿主防御肽，或者又被稱為陽離子抗菌肽（Cationicantimicrobial?peptides,?CAPs）能夠通過破壞細胞膜以及線粒體膜從而展現出了高效的殺傷癌細胞的能力。有趣的是，LfcinB25和LfcinB6兩種多肽在抗菌和抗癌方面展現出了比其親本蛋白牛乳鐵蛋白（BLF）更強的活性。同樣來源于乳鐵蛋白的LTX-315是一種溶瘤肽，在幾個臨床前模型中，通過瘤內注射LTX-315能夠導致特異性的免疫反應和腫瘤消退，然而根據研究表明，在接受LTX-315治療后，一些高惡性腫瘤會出現復發或轉移，以及腫瘤中PD-L1的表達會出現上調，另外，LTX-315也僅限于瘤內給藥，在血液中降解較快，不適用于一些無法通過瘤內給藥或轉移性的腫瘤。不僅如此，溶瘤肽的陽離子性和兩親性也給開發系統遞送帶來了巨大的挑戰。

這些年來，免疫治療已經成為了治療癌癥或延緩腫瘤進展的一種極為有效地方式，近年來有多種抗體，包括CTLA-4抗體、PD-1抗體和PD-L1抗體被用于治療肺癌、黑色素瘤和肝癌并展現出了一定的療效，然而總體的有效率僅約20~30%。值得注意的是，免疫佐劑CpG?ODNs（CpG）用于增強免疫治療效果，然而，CpG由于其進入細胞的能力較差，通常是在腫瘤內或腫瘤周圍注射，限制了其在很多腫瘤中的應用。

發明內容

本發明設計了環肽cRGDfK功能化修飾的、具有不對稱膜結構的聚合物囊泡（cRGD-CPs）作為溶瘤肽LTX-315（cRGD-CPs-L）的全身系統遞送的高效穩定載體，同時結合囊泡CpG佐劑和PD-1抗體，顯著增強了對小鼠惡性B16F10黑色素瘤的免疫治療的效果。聚合物囊泡是為數不多的能夠裝載水溶性藥物（包括小分子藥物、siRNA和蛋白質）并且遞送至腫瘤的載體系統之一。為了實現LTX-315和CpG?ODNs的有效裝載，cRGD-CPs的內殼分別被設計為帶有負電荷的聚天冬氨酸和帶有正電荷的精胺，通過系統注射cRGD-CPs-L能夠有效誘導B16F10黑色素瘤的免疫原性死亡，并且通過與cRGD-CPs-CpG和PD-1抗體的聯合，能夠實現強免疫應答和長期免疫記憶保護作用，完全治愈率達到約30%。這種通過系統給藥注射LTX-315和CpG?ODNs的方法大大擴展了它們的應用范圍，使其具備了治療難以瘤內給藥和轉移性腫瘤的可能性。

本發明采用如下技術方案：