[發明專利]一種宮頸癌免疫組化分析試劑盒及其制備方法

在審

• 申請號: 202110611277.8
• 申請日: 2021-06-01
• 公開（公告）號: CN113552351A
• 公開（公告）日: 2021-10-26
• 發明（設計）人: 馮瑾瑾
• 申請（專利權）人: 武漢康義盛生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/532;G01N21/65
• 代理公司: 武漢藍寶石專利代理事務所(特殊普通合伙) 42242
• 代理人: 嚴超

本發明涉及生物檢測技術領域，具體涉及一種宮頸癌免疫組化分析試劑盒。該試劑盒包括金屬?一抗復合納米粒子Ⅰ、金屬?二抗復合納米粒子Ⅱ、抗原修復液、清洗液，所述二抗中含有拉曼活性物質標記。本發明所提供的宮頸癌免疫組化分析試劑盒，通過金屬納米粒子表面增強拉曼散射特性的生物傳感器技術與免疫組化診斷相結合，能夠有效的解決現有技術中存在的人工閱片耗時耗力且受醫生的認知能力和經驗影響的問題，減少人工閱片容易出現不可控失誤的問題，提高檢測準確性和檢測效率。

技術領域

本發明涉及生物檢測技術領域，具體涉及一種宮頸癌免疫組化分析試劑盒。

背景技術

宮頸癌居于全球女性癌癥發病率的第二位，是重要的公共健康問題。全球每年新增宮頸癌病理約50萬，有27.3萬人死于宮頸癌，中國每年新增宮頸癌病例約有13.5萬人，占全球新發病例的1/3，因此，中國也是宮頸癌高發國之一。

目前，宮頸癌篩查普遍采用的是宮頸病變的三階梯診斷(液基細胞學、陰道鏡和組織病理學診斷)聯合HPV檢測，但早期診斷宮頸癌仍然比較困難。究其原因，主要有以下三點：(1)液基細胞學檢查對宮頸細胞病變級別并無明顯區分，且受主觀因素影響較大，如血液和黏液細胞的重疊會影響對異常細胞的辨識，降低準確性，導致假陰性率高，極易漏診誤診；(2)陰道鏡和組織病理學診斷均為有創性的檢查手段，同時存在取材不易到位、較難得到典型和充足的病理標本的問題；(3)HPV DNA檢測敏感度雖高，但特異性較低，其陽性結果只能提示是否存在短暫感染，預測宮頸癌發生與進展的價值有待進一步確認。因此，研究假陰性率高、特異性高，可以定量檢測宮頸癌樣本的檢測方法尤為重要。

發明內容

本發明針對現有技術中存在的技術問題，提供一種新的宮頸癌免疫組化分析試劑盒，該試劑盒準確度高且檢測效率高。

本發明解決上述技術問題的技術方案如下：本發明提供一種宮頸癌免疫組化分析試劑盒，包括金屬-一抗復合納米粒子Ⅰ、金屬-二抗復合納米粒子Ⅱ、抗原修復液、清洗液，所述二抗中含有拉曼活性物質標記。

作為一種優選地實施方式，所述金屬為可以與抗體發生配位反應的金屬粒子，所述金屬粒子的粒徑為10～1000nm。

作為一種優選地實施方式，所述金屬粒子選自鈦納米粒子、銅納米粒子、鎳納米粒子、銀納米粒子、鎘納米粒子、鋁納米粒子、鉑納米粒子和鈷納米粒子中的一種。

作為一種優選地實施方式，所述金屬粒子為銀納米粒子或銅納米粒子。

作為一種優選地實施方式，所述一抗為單克隆抗體，所述一抗選自單克隆抗體CD3、單克隆抗體p53、單克隆抗體ki-67、單克隆抗體CK7、單克隆抗體CK20、單克隆抗體TTF-1、單克隆抗體p16中的兩種或兩種以上。

作為一種優選地實施方式，所述金屬-一抗復合納米粒子Ⅰ包括金屬-單克隆抗體p16復合納米粒子和金屬-單克隆抗體ki-67復合納米粒子兩種溶液。

作為一種優選地實施方式，所述一抗為多克隆抗體，所述多克隆抗體選自多克隆抗體CD3、多克隆抗體p53、多克隆抗體ki-67、多克隆抗體CK7、多克隆抗體CK20、多克隆抗體TTF-1、多克隆抗體p16中的兩種或兩種以上。

作為一種優選地實施方式，所述金屬-一抗復合納米粒子Ⅰ包括金屬-多克隆抗體p16復合納米粒子和金屬-多克隆抗體ki-67復合納米粒子兩種溶液。

作為一種優選地實施方式，所述抗原修復液為pH為6.0的檸檬酸緩沖液或pH為8.0的EDTA緩沖液。

作為一種優選地實施方式，所述清洗液為PBST清洗液。

作為一種優選地實施方式，所述拉曼活性物質選自賴氨酸、二甲基甲酰胺、偶氮二甲酰胺、四溴酚藍、端氨基聚氨酯、2,6-二叔丁基對甲基苯酚、對氨基苯甲酸、偶氮甲堿、氨基吖啶中的一種。