[發明專利]一種珊瑚菜磷脂酶基因啟動子及其應用

有效

• 申請號: 202110607103.4
• 申請日: 2021-05-31
• 公開（公告）號: CN113215159B
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 李莉;周義峰;梁呈元;房海靈;亓希武;于盱;柏楊;劉冬梅
• 申請（專利權）人: 江蘇省中國科學院植物研究所
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/82;A01H5/02;A01H5/04;A01H5/06;A01H5/12;A01H6/20
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 邱興天

本發明公開了一種珊瑚菜磷脂酶基因啟動子及其應用，屬于生物技術領域。本發明提供的珊瑚菜磷脂酶基因啟動子，其序列如序列表中SEQ ID NO.1所示，應用該啟動子序列的重組表達載體進行轉基因，可以驅動下游基因在擬南芥葉片、根、莖等部位表達；并且應用該啟動子的反義序列重組表達載體進行植物轉基因，能夠實現下游基因在擬南芥雄蕊及柱頭中特異高效表達，在創制花粉敗育、雄性不育植物材料時具有重要應用價值。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，更具體地說，涉及一種珊瑚菜(Glehnia littoralisFr.Schmidt ex Miq.)磷脂酶基因啟動子及其應用。

背景技術

啟動子是功能基因5′端上游一段具有轉錄起始活性的DNA序列，是基因表達與調控重要的順式作用元件。根據啟動子的轉錄模式，可將植物源的啟動子分為三類：組成型啟動子、誘導型啟動子、組織特異性啟動子。組成型啟動子，即基因的表達是持續性的，不受時空的限制或某種物質的誘導，如花椰菜花葉病毒(CaMV)的35S啟動子CaMV35S、木薯葉脈花葉病毒啟動子CsVMV、玉米Ubiqutin啟動子等，通常用于獲得目的基因超量表達的轉基因植株。誘導型啟動子是指基因的表達可以通過不同信號刺激來調控，如受光、溫度、激素、病菌等因素誘導表達的啟動子。組織特異性啟動子，即啟動子調控基因僅在植物某些特定的器官或組織部位表達，在其它部位和發育階段不表達，具有發育調節的特性，如可以在根、莖、葉、花、種子中特異性表達的啟動子。

在植物基因功能研究中，通常需要將有應用價值基因通過轉基因技術導入植物體系中，進行功能驗證。通過選擇合適的啟動子，控制基因的表達部位、表達量以及表達方式，對深入了解及驗證基因功能有著重要的意義。由于組成型啟動子是恒定表達的，目的基因可以在轉基因植株的大多數部位表達，它的優點是強啟動，可以超量表達基因，放大基因功能，缺點是外源基因超量表達可能會產生功能冗余，影響植物的生長發育。組織特異性啟動子則可以彌補組成型啟動子的不足，可以縮小目標基因的研究范圍，控制表達模式，更有針對性進行科學研究。比如，應用根中特異性啟動子啟動目標基因僅在根部表達，可用于研究植物的滲透脅迫、營養吸收、根際分泌等問題；應用種子或果實特異性啟動子，有助于提高轉基因植物種子或果實的品質和產量，增加經濟價值；應用花中的特異性啟動子，可以進行植物受精、授粉、遺傳發育等研究，特別是用來調控雄蕊、花藥相關基因，也可利用基因工程手段創造雄性不育系。隨著生物技術的進步，人工合成啟動子在基因工程領域也備受關注，通過人工設計合成一段能夠滿足實踐需求的啟動子序列，能夠精準調節基因的表達模式，對相關基因網絡精細調控、組合優化，在代謝工程中應用廣泛。

因此，挖掘、改造以及合成各種功能特異性的啟動子，應用啟動子在分子、細胞、植株水平精細調控基因的時空表達模式，具有科學的意義和廣泛的前景。

發明內容

針對現有技術存在的上述問題，本發明所要解決的技術問題在于提供一種珊瑚菜磷脂酶基因啟動子。本發明還要解決的另一技術問題在于提供前述珊瑚菜磷脂酶基因啟動子的應用。

為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案如下：

一種珊瑚菜磷脂酶基因啟動子，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示。

所述的珊瑚菜磷脂酶基因啟動子在基因工程中作為啟動子的應用。

所述的應用是作為雙向啟動子的應用。

含有所述的珊瑚菜磷脂酶基因啟動子的重組載體。

所述的含有珊瑚菜磷脂酶基因啟動子的重組載體是重組植物表達載體。

所述的含有珊瑚菜磷脂酶基因啟動子的重組載體中所述的珊瑚菜磷脂酶基因啟動子和目的基因可操作的相連接。

所述的含有珊瑚菜磷脂酶基因啟動子的重組載體在啟動目的基因于植物葉片、根、莖、花序軸中特異表達的應用。