[發明專利]一種提高SARS-CoV-2突變毒株ECD抗原免疫原性/抗原三聚體穩定性的方法

在審

• 申請號: 202110606512.2
• 申請日: 2021-05-31
• 公開（公告）號: CN115477703A
• 公開（公告）日: 2022-12-16
• 發明（設計）人: 謝良志;孫春昀;張延靜
• 申請（專利權）人: 神州細胞工程有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;A61K39/215;A61P31/14
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 劉依云;王崇

本發明涉及分子疫苗學領域，提供了一種提高SARS?CoV?2突變毒株ECD抗原免疫原性/抗原三聚體穩定性的方法及一種免疫原性/抗原三聚體穩定性提高的SARS?CoV?2突變毒株ECD免疫原性蛋白/肽。包括但不限于基因組序列編號為GenBank Accession No.MN908947.3的SARS?CoV?2毒株、B.1毒株、B.1.1.7毒株或B.1.351毒株的刺突蛋白(S蛋白)的胞外結構域(ECD)，通過引入突變位點和三聚化輔助結構形成的同源三聚體從而提高ECD抗原免疫原性/抗原三聚體穩定性。所述疫苗進一步包含藥學上可接受的佐劑。該疫苗組合在小鼠和食蟹猴中顯示出優異的免疫原性，可維持長時程的體液免疫和細胞免疫反應。所述重組三聚體蛋白疫苗可用于預防SARS?CoV?2感染相關疾病。

技術領域

本發明涉及分子疫苗學領域，涉及一種提高SARS-CoV-2突變毒株ECD抗原免疫原性/抗原三聚體穩定性的方法及一種免疫原性/抗原三聚體穩定性提高的 SARS-CoV-2突變毒株ECD免疫原性蛋白/肽。

背景技術

新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)具有較強的傳播能力，安全有效的疫苗是控制疫情的最有力的技術手段。根據靶點和技術的不同，疫苗可以被分為以下幾類：滅活疫苗、重組蛋白疫苗、病毒載體疫苗、RNA疫苗、減毒活疫苗和病毒樣顆粒疫苗等。

SARS-CoV-2和SARS-CoV具有共同的宿主細胞受體蛋白，即血管緊張素轉化酶2(ACE2)(Zhou,P.,et al.,Discovery of a novel coronavirus associated with therecent pneumonia outbreak in humans and its potential bat origin.BioRxiv,2020.)。病毒的三聚體刺突蛋白(Spike)同ACE2受體結合后被宿主蛋白酶切割為包含受體結合域(Receptor binding domain,RBD)的S1多肽和負責介導病毒同細胞膜融合的S2多肽(Hoffmann,M.,et al.,SARS-CoV-2 cell entry depends on ACE2 and TMPRSS2 and isblocked by a clinically proven protease inhibitor.Cell,2020.)。S蛋白是病毒包膜的主要成分，在受體結合，融合，病毒進入和宿主免疫防御方面具有重要的作用。S蛋白的RBD區含有主要的中和抗體表位，可刺激B細胞產生針對RBD的高滴度中和抗體。此外，S蛋白還含有豐富的T細胞表位，可誘導 T細胞發生特異性CTL反應，清除病毒感染的細胞。因此，S蛋白是新冠疫苗設計的最關鍵抗原。目前設計的絕大多數疫苗都選擇了S蛋白或RBD結構域蛋白作為核心免疫原。