[發(fā)明專利]一種誘導(dǎo)甘蔗品種05-136開花的甘蔗鞭黑粉菌菌劑的制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202110605812.9
• 申請日: 2021-05-31
• 公開（公告）號: CN113373057A
• 公開（公告）日: 2021-09-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 顏梅新;宋修鵬;王澤平;張小秋;雷敬超;黃海榮;黃冬梅;李秋芳
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 南寧智卓專利代理事務(wù)所(普通合伙) 45129
• 代理人: 譚月萍;鄧世江

本發(fā)明公開了一種誘導(dǎo)甘蔗品種05?136開花的甘蔗鞭黑粉菌菌劑的制備方法，屬于生物菌劑領(lǐng)域。制備方法包括以下步驟：(1)獲得菌株：將甘蔗花上的甘蔗鞭黑粉菌冬孢子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得甘蔗鞭黑粉菌菌株，甘蔗鞭黑粉菌保藏編號為61390；(2)培養(yǎng)菌株：將菌株接種至YePSA培養(yǎng)基中培養(yǎng)；(3)獲得種子液：將YePSA培養(yǎng)基中的菌體接種至YePS液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)2d，獲得種子液；(4)獲得菌劑：將種子液按體積比1：50的比例接種至YePS液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)2d，最后獲得甘蔗鞭黑粉菌菌劑。本發(fā)明的菌劑可誘導(dǎo)甘蔗品種05?136開花，開花效率高，重復(fù)性好，對甘蔗開花機(jī)理研究，誘導(dǎo)甘蔗開花特別是難開花的甘蔗開花的研究具有重要參考作用和應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物菌劑技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種誘導(dǎo)甘蔗品種05-136開花的甘蔗鞭黑粉菌菌劑的制備方法。

背景技術(shù)

甘蔗黑穗病(Sugarcane smut)是重要的甘蔗病害，1877年甘蔗黑穗病首次報(bào)道于在南非納塔爾，隨后該病蔓延至東半球及西半球國家。我國則在1932 年報(bào)道廣州蔗區(qū)發(fā)生甘蔗黑穗病，隨后廣西、云南、福建，臺灣、海南等省先后報(bào)道該病害的發(fā)生。美國和澳大利亞相續(xù)報(bào)道了甘蔗黑穗病的發(fā)生，并迅速蔓延，成為主要的甘蔗病害。迄今，甘蔗黑穗病已成為世界上各甘蔗產(chǎn)區(qū)一種普遍發(fā)生的甘蔗病害。平均發(fā)病率為18％，宿根蔗發(fā)病高達(dá)50％。

甘蔗黑穗病最明顯特征是病蔗梢頭具一條向下內(nèi)卷的黑色鞭狀物，長度約20厘米至1米，直徑0.5cm左右。黑穗鞭中央是由寄主組織構(gòu)成的心柱，外圍包著一層厚垣孢子。染病蔗種萌芽早，莖細(xì)小，葉細(xì)長，淡綠，分蘗增多，分蘗后長出黑穗鞭。甘蔗鞭黑粉菌(Sporisorium scitamineum)是引起甘蔗黑穗病的重要病原，該病原菌屬擔(dān)子菌亞門黑粉菌屬。我們于2018年在廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院甘蔗研究所試驗(yàn)地中發(fā)現(xiàn)甘蔗花上長出黑色鞭狀物，經(jīng)分離、鑒定，該病原確系甘蔗鞭黑粉菌(Sporisorium scitamineum)，接種甘蔗多個(gè)品種，能誘導(dǎo)甘蔗品種05-136開花。甘蔗鞭黑粉菌可誘導(dǎo)甘蔗開花迄今未見報(bào)道。

甘蔗是無性繁殖作物，但在適宜環(huán)境條件下，也可以開花結(jié)實(shí)，為甘蔗有性雜交育種提供了有效可行的途徑。甘蔗開花習(xí)性是甘蔗遺傳育種與大田生產(chǎn)密切相關(guān)的一個(gè)重要性狀，在有性雜交育種中，只有開花材料才能用作親本，因而應(yīng)盡最大可能地誘導(dǎo)甘蔗開花。據(jù)報(bào)道，影響甘蔗開花的因素有很多，可分為內(nèi)外兩種因素，外因條件有緯度、氣候、海拔、土壤、肥料等栽培條件，其中以光、溫、濕等因素最為重要，內(nèi)因主要是品種的遺傳特性、生育時(shí)期和葉片等。甘蔗的開花習(xí)性是可遺傳的性狀，但在不同年際間甘蔗開花習(xí)性差別很大，我國甘蔗誘導(dǎo)開花，一般在海南進(jìn)行，在廣西甘蔗很少開花。對甘蔗開花機(jī)理研究，誘導(dǎo)甘蔗開花特別是難開花的甘蔗開花的研究具有重要參考作用和應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種誘導(dǎo)甘蔗品種05-136開花的甘蔗鞭黑粉菌菌劑的制備方法。根據(jù)本發(fā)明的甘蔗鞭黑粉菌菌劑的制備方法，通過此方法能制備出使甘蔗品種05-136開花的菌劑，且開花效率高，重復(fù)性好，對難開花的甘蔗開花的研究具有重要參考作用和應(yīng)用價(jià)值，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了一種誘導(dǎo)甘蔗品種05-136開花的甘蔗鞭黑粉菌菌劑的制備方法，包括以下步驟：

(1)獲得菌株：將甘蔗花上分離獲得的甘蔗鞭黑粉菌的冬孢子經(jīng)無菌水懸浮后涂板于2％瓊脂培養(yǎng)基中，在28℃的條件下培養(yǎng)1天；將瓊脂培養(yǎng)基中的白色菌絲體接種至YePS液體培養(yǎng)基中，在28℃條件下?lián)u床，轉(zhuǎn)速設(shè)定為200，并培養(yǎng)2天，獲得甘蔗鞭黑粉菌菌株，所述甘蔗鞭黑粉菌保藏編號為61390；

(2)培養(yǎng)菌株：將甘蔗鞭黑粉菌菌株接種至YePSA培養(yǎng)基中，在28℃的條件下培養(yǎng)2d；

(3)獲得種子液：將YePSA培養(yǎng)基中的菌體接種至YePS液體培養(yǎng)基中，在28℃條件下?lián)u床，搖床的轉(zhuǎn)速設(shè)定為200rpm，并培養(yǎng)2d，獲得種子液；