[發明專利]一種2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸鹽的檢測方法

在審

• 申請號: 202110602298.3
• 申請日: 2021-05-31
• 公開（公告）號: CN113504315A
• 公開（公告）日: 2021-10-15
• 發明（設計）人: 孫圓麗;李愛琴;蘇小楠;楊卓理;岳玉榮
• 申請（專利權）人: 北京斯利安藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74;G01N30/86
• 代理公司: 北京元周律知識產權代理有限公司 11540
• 代理人: 孫小萬

本發明提供了一種2,4,5,6?四氨基嘧啶硫酸鹽的檢測方法，含有2,4,5,6?四氨基嘧啶硫酸鹽的樣品進行HPLC分離、檢測；分離檢測采用的流動相包括緩沖溶液和有機相；所述緩沖溶液包括磷酸氫二鈉?檸檬酸緩沖溶液、磷酸氫二鉀?檸檬酸緩沖溶液中的一種。該方法簡單，可操作性強。

技術領域

本發明為醫藥分析領域，具體涉及一種2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸鹽的檢測方法。

背景技術

2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸鹽(以下簡稱四氨基嘧啶硫酸鹽)是合成甲氨蝶呤的中間體，同時也是抗腫瘤藥物氨喋噙的中間體。該樣品的分析方法報道較少，其中，現有技術報道了采用液質方法檢測染發劑中四氨基嘧啶硫酸鹽的方法，但該方法需要連接質譜檢測器，并非常見的連接紫外檢測器的普通高效液相色譜法。

發明內容

本發明通過采用連接紫外檢測器的普通高效液相色譜法，提供了一種2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸鹽的檢測方法，該方法簡單，可操作性強。

根據本申請的第一方面，提供一種2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸鹽的檢測方法。

一種2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸鹽的檢測方法，將含有2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸鹽的樣品進行HPLC分離、檢測；

分離檢測采用的流動相包括緩沖溶液和有機相；

所述緩沖溶液包括磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖溶液、磷酸氫二鉀-檸檬酸緩沖溶液中的一種。

可選地，所述緩沖溶液為磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖溶液。

可選地，所述緩沖溶液的pH值為3.0～3.4。

可選地，所述緩沖溶液的pH值為3.1～3.3。

可選地，所述緩沖溶液的pH值為3.2。

可選地，所述緩沖溶液的pH值上限選自3.05、3.10、3.15、3.20、3.25、3.30、3.35或3.40；下限選自3.00、3.05、3.10、3.15、3.20、3.25、3.30或3.35。

可選地，所述緩沖溶液和所述有機相的體積比為96～100：4～0。

可選地，所述緩沖溶液和所述有機相的體積比為97～99：1～3。

可選地，所述緩沖溶液和所述有機相的體積比為98：2。

可選地，所述有機相包括甲醇、乙腈中的至少一種。

可選地，所述有機相為甲醇。

可選地，所述流動相的流速為0.8～1.2mL/min。

可選地，所述流動相的流速為1.0mL/min。

可選地，分離檢測采用的固定相為C18柱。

可選地，色譜條件包括：柱溫為20℃～30℃；檢測波長為275～285nm；進樣量為10～20μl。

優選地，色譜條件包括：柱溫為25℃；檢測波長為280nm；進樣量為10μl。

可選地，檢測前包括用緩沖溶液對2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸鹽的樣品進行溶解的過程。

具體地，由于四氨基嘧啶硫酸鹽為易解離化合物，故需合適的pH值緩沖鹽作為流動相，以抑制樣品的解離；本發明采用無水磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖溶液-甲醇體系作為流動相，調節緩沖液的pH值在3.0～3.4之間，優選pH為3.2。

具體地，所述緩沖溶液的組成為20mmol/L無水磷酸氫二鈉和10mmol/L檸檬酸。

本發明的有益效果如下所述：