[發明專利]一種細胞培養方法有效
| 申請號： | 202110596156.0 | 申請日： | 2021-05-30 |
| 公開（公告）號： | CN113430164B | 公開（公告）日： | 2023-02-10 |
| 發明（設計）人： | 胡豫;梅恒;姚惟琦;唐宇翔 | 申請（專利權）人： | 華中科技大學同濟醫學院附屬協和醫院 |
| 主分類號： | C12N5/0775 | 分類號： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 武漢信合紅谷知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42264 | 代理人： | 蔣明 |
| 地址： | 430022 湖北*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 細胞培養 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種細胞培養方法，其特征在于，其包含以下步驟：
(1)將纖維蛋白原與間充質干細胞混合，所得混合液中纖維蛋白原的濃度為0.5mg/ml；
(2)向步驟(1)所得混合液中加入凝血酶使混合液中凝血酶濃度為5.67×10-3U/μl。
2.權利要求1所述的細胞培養方法，其特征在于，步驟(1)中，所述纖維蛋白原的濃度在混合前通過緩沖液調整，所述緩沖液為T7緩沖液，所述T7緩沖液包含Tris和NaCl，所述Tris的濃度為50mM，所述NaCl的濃度為150mM，所述T7緩沖液的pH為7.4；
步驟(1)中所述混合時按纖維蛋白原溶液與間充質干細胞溶液的體積比為1:1混合，混合前間充質干細胞溶液濃度為1×105個/ml，混合后纖維蛋白原溶液濃度為0.5mg/ml。
3.權利要求2所述的細胞培養方法，其特征在于，步驟(1)中所述混合液中混合后的間充質干細胞的濃度為2×104～8×104個/ml；
所述間充質干細胞為臍帶間充質干細胞。
4.權利要求1所述的細胞培養方法，其特征在于，其還包含以下步驟：
(3)將步驟(2)中所得混合液孵育至形成凝膠，孵育的時間為10～30min，孵育的溫度為37℃；
(4)加入細胞完全培養基。
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