[發(fā)明專利]抗PIVKA-II單克隆抗體及其應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110581767.8
• 申請日: 2021-05-26
• 公開（公告）號: CN113372447A
• 公開（公告）日: 2021-09-10
• 發(fā)明（設計）人: 易維京;趙忠灝;邊穎;蔡方琴;張麗華
• 申請（專利權）人: 重慶中元匯吉生物技術有限公司
• 主分類號: C07K16/40
• 分類號: C07K16/40;G01N33/577;G01N33/573
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• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明涉及生物技術領域，具體涉及抗PIVKA?II單克隆抗體及其應用。公開了一組可以配合使用的PIVKA?II單克隆抗體，本發(fā)明PIVKA?II單克隆抗體與PIVKA?II結合具有高特異性和穩(wěn)定性，應用到試劑盒中可以實現實現對PIVKA?II的高靈敏度、高精密度、寬線性范圍的檢測。

技術領域

本發(fā)明涉及生物技術領域，具體涉及抗PIVKA-II單克隆抗體及其應用。

背景技術

異常凝血酶原(PIVKA-II)，是一種維生素K缺乏誘導蛋白。正常情況下維生素K充足，凝血酶原Gla結構域的10個谷氨酸殘基(Glu)能被γ-谷氨酰羧化酶氧化成γ-羧基谷氨酸(Gla)，使之成為有活性的凝血酶原。當肝臟發(fā)生異常時，上述位點的一個或多個Glu殘基羧化不全，從而形成PIVKA II，喪失凝血活性。因此，PIVKA-II的檢測對于肝臟病變至關重要。

目前已知的蛋白檢測方法較多，例如：放射免疫分析法(RIA)、酶免疫分析法(EIA)、化學發(fā)光免疫法(CLEIA)等。但RIA容易受到放射性同位素的輻射影響，EIA靈敏度低、準確性不高，已逐漸被市場淘汰，相對而言，CLEIA因為其簡單的操作和較高的靈敏度逐漸受到關注，成為醫(yī)療診斷行業(yè)中更佳的選擇。

早期的化學發(fā)光檢測PIVKA II，多采用特異性識別PIVKA II的抗體與識別凝血酶原的抗體搭配使用，但存在檢測靈敏度較低的問題，為了改善靈敏度，目前多采用多克隆抗體與單克隆抗體混合使用，但多克隆抗體本身特異性不如單克隆抗體，且因為制備批次不同，容易出現批間差，導致檢測精密度降低。所以，高特異性且能配對使用的單克隆抗體，會是化學發(fā)光檢測PIVKA II，甚至其他采用雙抗夾心檢測PIVKA II方法學的更好選擇，但目前市面上使用的單克隆抗體可選擇性較少，且特異性不夠，亟待開發(fā)更多可供選擇的高特異性單克隆抗體。

發(fā)明內容

為了解決目前利用雙抗夾心檢測PIVKA II中存在的靈敏度和精密度不高的問題，本發(fā)明公布了高特異性的單克隆抗體，具體如下：

抗PIVKA II單克隆抗體，包括：

如SEQ ID NO：1所列的重鏈可變區(qū)CDR1；

如SEQ ID NO：2所列的重鏈可變區(qū)CDR2；

如SEQ ID NO：3所列的重鏈可變區(qū)CDR3；

如SEQ ID NO：4所列的輕鏈可變區(qū)CDR1；

如SEQ ID NO：5所列的輕鏈可變區(qū)CDR2；

如SEQ ID NO：6所列的輕鏈可變區(qū)CDR3；

上述抗PIVKA II單克隆抗體，命名為抗體D

優(yōu)選的，本發(fā)明公開了抗PIVKA II單克隆抗體對，包括權利要求1中所述的抗體D及

如SEQ ID NO：7所列的重鏈可變區(qū)CDR1；

如SEQ ID NO：8所列的重鏈可變區(qū)CDR2；

如SEQ ID NO：9所列的重鏈可變區(qū)CDR3；

如SEQ ID NO：10所列的輕鏈可變區(qū)CDR1；

如SEQ ID NO：11所列的輕鏈可變區(qū)CDR2；

如SEQ ID NO：12所列的輕鏈可變區(qū)CDR3；

上述抗PIVKA II單克隆抗體，命名為抗體A

或

如SEQ ID NO：13所列的重鏈可變區(qū)CDRl；

如SEQ ID NO：14所列的重鏈可變區(qū)CDR2；