[發明專利]一種綜合評價靈芝菌絲體抗氧化活性的方法

在審

• 申請號: 202110575404.3
• 申請日: 2021-05-25
• 公開（公告）號: CN113298381A
• 公開（公告）日: 2021-08-24
• 發明（設計）人: 韓偉;鄭丹婷;陳煉茹;馮杰;馮娜;卜原玲;姚澤遠
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: G06Q10/06
• 分類號: G06Q10/06;G06F17/18
• 代理公司: 上海大邦律師事務所 31252
• 代理人: 胡紅芳

1.一種綜合評價靈芝菌絲體抗氧化活性的方法，其特征在于：包括如下步驟：

(1)用靈芝菌絲體制備水提液；

(2)分別測定所述水提液的各項抗氧化評價指標值；

(3)以熵權法給步驟(2)中所述抗氧化評價指標值賦予權重；

(4)依據步驟(2)的所述抗氧化評價指標值和步驟(3)得到的所述權重，計算獲得所述靈芝菌絲體的綜合抗氧化活性Z值。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述抗氧化評價指標值為DPPH自由基清除率、羥自由基清除率和/或ABTS自由基清除率。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述水提液的制備條件為：精密稱取靈芝菌絲體固體0.05～2g，在液固比20～70mL/g、超聲溫度30～60℃、超聲時間15～75min、超聲功率72～180W的條件下進行超聲水提，提取后將溶液離心，取適量上清液配制成1～2mg/mL的靈芝菌絲體提取液。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述DPPH自由基清除率的測定方法為：取所述水提液2mL置于棕色容量瓶，加入2mL吸光度為0.7±0.01的DPPH自由基工作溶液，避光反應30min后測定517nm處的吸光度，用95％乙醇調零；

然后，按式(1)計算DPPH自由基清除率S₁，重復三次，取平均值：

其中，A_i為所述水提液與所述DPPH自由基工作溶液反應后的吸光度，A_j為用95％乙醇代替所述DPPH自由基工作溶液測得的所述水提液的本底吸光度，A₀為以去離子水代替所述水提液測得的空白吸光度。

5.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述水提液的羥自由基清除率的測定方法為：取所述水提液1mL置于具塞試管中，依次加入1mL 9mmol/L FeSO₄和8.8mmol/L H₂O₂溶液，室溫下靜置反應10min后，再移入1mL 9mmol/L水楊酸-乙醇溶液，混合均勻后于37℃水浴條件下保溫30min，待所述水提液與水楊酸反應體系充分反應后，將溶液離心，檢測上清液在510nm處的吸光度A_i’，用去離子水調零；

然后，按式(2)計算羥自由基清除率S₂，重復三次，取平均值：

其中，A_j’為用去離子水代替H₂O₂測得所述水提液的本底吸光度，A₀’為以去離子水代替所述水提液后測得的空白吸光度；

所述水楊酸反應體系是指，所述H₂O₂與FeSO₄反應生成的羥自由基被水楊酸捕獲后生成在510nm處有明顯吸收的2，3-二羥基苯甲酸。

6.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述水提液的ABTS自由基清除率測定方法為：取所述水提液1mL于棕色容量瓶，加入4mL吸光度為0.7附近的ABTS自由基工作溶液后搖勻，避光反應6min后測定溶液在734nm處的吸光度；

然后，按式(3)計算ABTS自由基清除率S₃，重復實驗三次，取平均值：

其中，A_i”為所述水提液與所述ABTS自由基工作溶液反應后的吸光度，A_j”為用磷酸鹽緩沖液代替所述ABTS自由基工作溶液后測得樣品溶液的本底吸光度，A₀”為以去離子水代替所述水提液后測得的空白吸光度。