[發明專利]胰腺癌相關的lncRNA標志物、探針及檢測試劑盒在胰腺癌診斷中的應用

有效

• 申請號: 202110567302.7
• 申請日: 2021-05-24
• 公開（公告）號: CN113249479B
• 公開（公告）日: 2022-05-20
• 發明（設計）人: 項紅;陶旭鋒;周琪;郭方悅
• 申請（專利權）人: 大連醫科大學附屬第一醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/113;C12N15/11
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責任公司 21212
• 代理人: 周媛媛;李馨

本發明公開了胰腺癌相關的lncRNA標志物、探針及檢測試劑盒在胰腺癌診斷中的應用，屬于基因工程生物技術領域。所述的lncRNA組合為：CASC2、PVT1以及內參GAPDH；所述CASC2為如SEQ.ID.NO.1和SEQ.ID.NO.2所示的引物序列以及SEQ.ID.NO.3所示的探針核苷酸序列；所述PVT1為如SEQ.ID.NO.4和SEQ.ID.NO.5所示的引物序列以及SEQ.ID.NO.6所示的探針核苷酸序列；所述GAPDH為如SEQ.ID.NO.7和SEQ.ID.NO.8所示的引物序列以及SEQ.ID.NO.9所示的探針核苷酸序列。本發明上述lncRNA組合可作為胰腺癌診斷標志物：CASC2和PVT1。檢測出所述標記物PVT1、CASC2在胰腺癌患者組織中低表達。本發明提供的標記物可應用于制備胰腺癌早期評估產品中，有利于進一步闡明胰腺癌發病機制，并為發現具有潛在治療價值的新型小分子藥物靶標提供幫助。

技術領域

本發明涉及胰腺癌相關的lncRNA標志物、探針及檢測試劑盒在胰腺癌診斷中的應用，屬于基因工程生物技術領域。

背景技術

胰腺癌是最常見的消化道惡性腫瘤之一，主要起源于胰腺導管上皮和腺泡細胞。預計到2030年，胰腺癌將成為癌癥相關死亡的第二大誘因，甚至在某些地區躍升為頭號癌癥殺手。據中國國家癌癥中心2018年發布的居民癌癥數據顯示，我國胰腺癌發病率排名第10，死亡率排名第5，5年相對存活率僅為7.2％。胰腺癌患者缺乏早期癥狀或癥狀不典型，多數患者就診時疾病已經進入晚期階段，往往已喪失手術時機。由于腫瘤細胞已經擴散到胰腺外且對化療藥物耐藥，導致傳統非手術療法通常無效。盡管成像技術和腫瘤標志物篩查已經取得了一些進展，但由于缺乏精準可靠觀察指標，胰腺癌早期診斷仍面臨極大挑戰。因此，篩查敏感有效的生物標志物，提高胰腺癌早期診斷水平，是改善胰腺癌預后的一個關鍵因素。

目前，血清糖類抗原19-9(Carbohydrate antigen19-9,CA19-9)是美國食品藥品監督管理局批準的唯一的胰腺癌診斷標記物。但CA19-9并不是胰腺癌獨有的，其對宿主的炎癥反應和阻塞性黃疸也很敏感。因此，現迫切需要一種操作簡便且特異性及靈敏度均較高的早期評估方法。

長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)通常被定義為超過200個核苷酸的非蛋白質RNA轉錄本。基于高通量測序技術，遺傳研究在哺乳動物中發現了成千上萬的表達lncRNA轉錄本的基因位點。目前在人和小鼠中鑒定出的lncRNA的數量分別為172,216和131,697，遠遠超過了鑒定出的經典蛋白質的數量，并且預計lncRNA的數量還將繼續增加。在各種組織和疾病中觀察到的不同lncRNA表達模式，可以在發育和病生理環境中調控多種重要的信號轉導，并可以表觀遺傳調控等方式影響腫瘤細胞生長、凋亡、耐藥與轉移。越來越多的證據顯示，胰腺組織lncRNA異常表達與胰腺內、外分泌功能不全以及癌癥進展密切相關。lncRNA標記物在胰腺癌調控機制中的研究目前正處于起步階段。因此，探索lncRNA單獨或組合作為胰腺癌早期篩查標記物，不僅對胰腺癌早期診斷具有重要作用，還能為胰腺癌基因靶向治療提供參考。

發明內容

本發明的主要目的是針對上述問題，提出一組與胰腺癌相關的lncRNA標志物、以及LncRNA標志物在制備胰腺癌診斷試劑盒中的應用。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

本發明提供了一組與胰腺癌相關的lncRNA標志物組合，所述的lncRNA標志物組合為：CASC2和PVT1；所述CASC2的引物序列如SEQ.ID.NO.1和SEQ.ID.NO.2所示；所述PVT1的引物序列如SEQ.ID.NO.4和SEQ.ID.NO.5所示。

本發明提供了一系列基于胰腺癌相關的lncRNA標志物的探針，所述探針能特異性捕獲包括權利要求1所述的lncRNA標志物。該探針是由上海生工生物工程股份有限公司定制合成的TaqMan探針。