[發明專利]一種基于離心法的細胞蠟塊自動制備系統及其方法

有效

• 申請號: 202110563002.1
• 申請日: 2021-05-24
• 公開（公告）號: CN113390700B
• 公開（公告）日: 2022-12-23
• 發明（設計）人: 洪明
• 申請（專利權）人: 杭州電子科技大學
• 主分類號: G01N1/36
• 分類號: G01N1/36;G01N1/28;G01N1/31;G01N1/44
• 代理公司: 浙江千克知識產權代理有限公司 33246
• 代理人: 周希良

1.一種基于離心法的細胞蠟塊自動制備系統，其特征在于，包括轉盤、試管、抽取石蠟裝置、取液裝置、套筒加熱裝置以及攪拌裝置；

所述轉盤具有多個對稱布置的，用于固定試管的固定孔；

所述試管包括試管壁，試管壁的外側中下部具有定位塊，試管壁的內側底部鑲嵌有金屬片，所述金屬片表面光滑，所述金屬片所在的試管壁底部為可拆卸結構或可剪裁分離；

所述抽取石蠟裝置用于向試管內加入或吸取液體石蠟；

所述取液裝置用于向試管內加入試劑，及從試管中取液；

所述套筒加熱裝置設置在轉盤下方，包括可升降的加熱套筒，所述加熱套筒頂部具有與試管壁定位塊相適配的定位凸起，所述加熱套筒容器內形狀與試管的外部形狀相適配以包裹試管底部，所述加熱套筒內具有加熱膜；

所述攪拌裝置包括攪拌臂、攪拌棒，所述攪拌臂控制攪拌棒伸入或伸出試管，及控制攪拌動作；

所述試管底部為圓臺結構，所述試管由試管口縮口至底部圓臺；

所述抽取石蠟裝置包括第一機械臂、石蠟吸取管路、第一工作泵、第一電磁閥、金屬石蠟池，所述金屬石蠟池附有加熱器，所述第一機械臂控制石蠟吸取管路伸入或伸出試管，所述石蠟吸取管路連通金屬石蠟池，所述第一工作泵、第一電磁閥安裝于石蠟吸取管路上；

所述取液裝置包括第二機械臂、導管、第二工作泵、第二電磁閥、若干試劑瓶，所述第二機械臂控制導管伸入或伸出試管，所述導管連通若干試劑瓶，所述第二工作泵、第二電磁閥安裝于導管上。

2.如權利要求1所述的一種基于離心法的細胞蠟塊自動制備系統，其特征在于，所述試管壁的外側貼附有金屬網膜。

3.一種基于如權利要求1-2任一項所述的一種基于離心法的細胞蠟塊自動制備系統的方法，包括步驟：

S1 .取樣：將待制備細胞蠟塊的細胞液置入試管中,并將試管放置于轉盤固定孔內固定；

S2 .形成細胞團塊：通過離心將密度大的物質聚集于試管底部，形成細胞團塊；

其中，離心指轉盤以1000-2000轉/秒，旋轉1-2分鐘，取液裝置將試管內的上清液體或試劑吸出，或者抽取石蠟裝置將上層液體石蠟吸出；

S3 .固定：加入固定用試劑、攪拌、自然沉淀、重復攪拌沉淀、離心，固定過程歷時2小時，固定過程保證試管內的試劑高于底部的細胞團塊5cm；

其中，加入固定用試劑指取液裝置向試管內加入5-10ml濃度為10％的中性福爾馬林；

攪拌指攪拌裝置控制攪拌棒伸入試管內進行攪拌動作，將細胞團塊攪拌、打散后，伸出攪拌棒；自然沉淀指試管內細胞液體自然沉淀5-10分鐘；重復攪拌沉淀指重復3-4次的攪拌、自然沉淀；

S4 .脫水：包括一次脫水和二次脫水，所述一次脫水的過程為加入一次脫水用試劑、攪拌、自然沉淀、重復攪拌沉淀、離心，一次脫水過程歷時1.5小時；所述二次脫水的過程為加入二次脫水用試劑、攪拌、自然沉淀、重復攪拌沉淀、離心，二次脫水過程歷時1.5小時；

其中，加入一次脫水用試劑指取液裝置向試管內加入濃度為95％的酒精；加入二次脫水用試劑指取液裝置向試管內加入無水酒精；

S5 .染色：加入染色用試劑、攪拌、自然沉淀、重復攪拌沉淀，染色過程歷時20分鐘，染色過程保證試管內的試劑高于底部的細胞團塊2cm；

其中，加入染色用試劑指取液裝置向試管內加入1—2ml伊紅；

S6 .透明：加入透明用試劑、攪拌、自然沉淀、重復攪拌沉淀、離心，透明過程歷時30分鐘，透明過程保證試管內的試劑高于底部的細胞團塊5cm；其中，加入透明用試劑指取液裝置向試管內加入二甲苯；

S7 .浸泡石蠟：加入液體石蠟、試管加熱、攪拌、自然沉淀、重復攪拌沉淀、試管脫離加熱、離心，浸泡石蠟過程歷時1.5小時，浸泡石蠟過程中試管的溫度在60—70℃，浸泡石蠟過程保證試管內的液體石蠟高于底部的細胞團塊5cm；

其中，加入液體石蠟指抽取石蠟裝置向試管內加入液體石蠟；試管加熱指加入液體石蠟的同時，套筒加熱裝置控制加熱套筒上升至加熱套筒定位凸起與試管壁定位塊抵靠時停止，此時加熱套筒包裹試管底部，加熱套筒內加熱膜開始加熱；試管脫離加熱指離心前，套筒加熱裝置控制加熱套筒下降至脫離試管；

S8 .取出試管：拆卸或剪裁分離試管壁底部，剝離金屬片獲得細胞蠟塊。

4.如權利要求3所述的一種基于離心法的細胞蠟塊自動制備系統的方法，其特征在于，步驟中取液裝置的管路連通有清水，向試管內加入試劑前及從試管中取液前，均通過清水對取液裝置的管路進行沖洗。