[發明專利]一種多功能融合蛋白

有效

• 申請號: 202110549008.3
• 申請日: 2021-05-20
• 公開（公告）號: CN113321735B
• 公開（公告）日: 2023-01-06
• 發明（設計）人: 姜曉玲
• 申請（專利權）人: 盛禾（中國）生物制藥有限公司
• 主分類號: C07K16/46
• 分類號: C07K16/46;C12N15/13;A61K39/395;A61P35/00;A61P35/02
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本發明提供了一種融合蛋白，其包含特異性結合PD?L1的第一結合域，特異性結合CD47的第二結合域，以及與FcR結合的第三結合域，其中第一結合域與第二結合域通過接頭連接。本發明還提供了包含所述融合蛋白的組合物及其用途。

技術領域

本發明涉及多功能融合蛋白，特別是特異性結合PD-L1與CD47的多功能融合蛋白。

背景技術

PD-L1與PD-1

程序性死亡分子PD-1及其配體PD-L1是適應性免疫檢查點抑制劑的靶點，正常情況下，組織表面的PD-L1與淋巴細胞表面的PD-1結合后，可以抑制淋巴細胞功能，誘導淋巴細胞的凋亡，從而在自身免疫耐受及防止自身免疫性疾病中發揮重要作用。研究表明多種腫瘤細胞表達PD-L1，可以與腫瘤浸潤淋巴細胞表面的PD-1分子結合，抑制CD4和CD8T淋巴細胞的功能和細胞因子的釋放，誘導淋巴細胞凋亡，從而導致腫瘤發生免疫逃逸。

目前已經有多個針對PD-L1/PD-1靶點藥物的藥物上市，對于腫瘤的治療有了革命性的改變。但是這療法的平均有效率仍在20％左右，且受到PD-L1表達水平的限制，臨床仍然需要有效的其它腫瘤治療藥物，目前已把研究方向轉向了另一個領域-先天免疫系統的藥物開發。

CD47與SIRPα

巨噬細胞屬于天然免疫系統，是抗腫瘤免疫的第一道防線，研究表明巨噬細胞廣泛分布于腫瘤組織中，在腫瘤組織中的比例為20％-40％。表達在巨噬細胞表面的信號調節蛋白α(SIRPα)和在靶細胞表面的CD47結合形成的抗吞噬信號軸，是巨噬細胞免疫檢查點重要的通路。研究表明多種腫瘤細胞(急性髓性白血病、急性淋巴細胞白血病乳腺癌、慢性淋巴細胞性白血病、慢性粒細胞白血病、彌漫性大B細胞、淋巴瘤、結腸癌)等均高表達CD47，腫瘤細胞表面CD47與巨噬細胞表面的信號調節蛋白α(SIRPα)結合后，傳導“別吃我”信號，抑制巨噬細胞對腫瘤細胞的吞噬作用，其表達水平與腫瘤的侵襲能力、患者的預后密切相關。因而阻斷CD47-SIRPα激活巨噬細胞對腫瘤的吞噬作用成為新的抗腫瘤藥物研究熱點。

Fc與ADCC和ADCP

抗體的Fc段可以與免疫細胞表面表達的Fc受體(FcγRI，FcγRII，FcγRIII)、血液中的補體(C1q)和FcRn結合，從而激活免疫效應清除外來物等。而Fc段決定抗體的效應功能，包括抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用(ADCC)、抗體依賴性細胞介導的吞噬作用(ADCP)，以及補體依賴的細胞毒性作用(CDC)。

ADCC，抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用(Antibody-Dependent Cell-mediated Cytotoxicity)，是指抗體的Fab段結合病毒感染的細胞或腫瘤細胞的抗原表位，其Fc段與殺傷細胞(NK細胞、巨噬細胞、中性粒細胞等)表面的FcR結合，介導殺傷細胞直接殺傷靶細胞，是抗腫瘤的治療性抗體藥物發生作用的一種作用重要機制。

CN111763261A公開了一種能夠特異性結合PD-L1和CD47的融合蛋白，雖然具有同時阻斷PD-1/PD-L1和CD47/SIRPα的相互作用，但是并未報道融合蛋白的ADCC效應，也未考慮紅細胞凝聚的現象。

PCT/CN2018/111745公開了一種同時與CD47和PD-L1結合的重組雙功能融合蛋白，但是并未考慮紅細胞凝聚的現象。

由于紅細胞表面表達CD47分子，嚴重的貧血反應是靶向CD47抗體藥物臨床開發的主要障礙，因此，紅細胞凝聚現象是藥物研發過程中必須重視的一個問題。而目前尚未公開沒有紅細胞凝聚現象的、同時與CD47和PD-L1結合的融合蛋白。

本發明是首次公開同時具有阻斷PD-1/PD-L1的相互作用、阻斷CD47/SIRPα的相互作用、具有ADCC效應、具有ADCP效應、且未出現紅細胞凝聚現象的PD-L1/SIRPα融合蛋白。

發明內容