[發(fā)明專利]一種基于腫瘤細(xì)胞膜的生物活性制劑及其制備方法與應(yīng)用

有效

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• 申請日: 2021-05-18
• 公開（公告）號: CN113304269B
• 公開（公告）日: 2022-07-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 欒玉霞;李倩
• 申請（專利權(quán)）人: 山東大學(xué)
• 主分類號: A61K45/06
• 分類號: A61K45/06;A61K47/61;A61K47/69;A61K9/06;A61P35/00;A61P37/04
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 李圣梅

本發(fā)明提供一種基于腫瘤細(xì)胞膜的生物活性制劑及其制備方法與應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過提取荷瘤小鼠的腫瘤組織，并處理加工形成腫瘤細(xì)胞膜囊泡，經(jīng)化學(xué)修飾后形成可在腫瘤組織中原位形成凝膠的凝膠因子，在共載細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶5(CDK5)抑制劑和外泌體抑制劑后，可以有效的調(diào)控腫瘤細(xì)胞和腫瘤外泌體PD?L1，從而同時(shí)解除局部和系統(tǒng)性免疫抑制，因此具有良好的實(shí)際應(yīng)用之價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于腫瘤細(xì)胞膜的生物活性制劑及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)

公開該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在增加對本發(fā)明的總體背景的理解，而不必然被視為承認(rèn)或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已經(jīng)成為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

通常認(rèn)為程序性死亡1配體(PD-L1)在腫瘤細(xì)胞表面上起作用，然而基于PD-L1阻斷的免疫療法臨床病例中失敗率仍然很高。當(dāng)前增強(qiáng)基于PD-L1的療法的反應(yīng)效率的方法僅限于局部調(diào)節(jié)腫瘤部位，例如增加腫瘤的免疫原性和重塑腫瘤的免疫微環(huán)境，而忽視了系統(tǒng)性的免疫抑制因素。值得注意的是，PD-L1還在腫瘤細(xì)胞衍生的外泌體表面表達(dá)，它隨外泌體循環(huán)至全身，從而結(jié)合并耗竭循環(huán)中的T細(xì)胞，產(chǎn)生全身性免疫抑制全身，因此，對于免疫檢查點(diǎn)治療，循環(huán)外泌體PD-L1的調(diào)節(jié)與腫瘤細(xì)胞PD-L1的調(diào)節(jié)一樣重要。

但是目前的PD-L1阻斷抗體對外泌體PD-L1無效，原因之一是外泌體上PD-L1的獨(dú)特表達(dá)方式使其對抗體的反應(yīng)性降低。另一個(gè)原因是，外泌體可以循環(huán)至一些能屏蔽抗體作用的部位。迄今為止，在臨床實(shí)踐中還沒有一種可以直接靶向外泌體PD-L1的藥物，因此對精確調(diào)控外泌體PD-L1提出了挑戰(zhàn)。而直接抑制腫瘤細(xì)胞外泌體的產(chǎn)生為降低總外泌體PD-L1提供了另一種策略。但是，考慮到正常細(xì)胞分泌的外泌體對維持正常生理至關(guān)重要，如何選擇性地抑制腫瘤特異性外泌體從而降低潛在的全身毒性是另外一個(gè)亟待解決的難題。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種基于腫瘤細(xì)胞膜的生物活性制劑及其制備方法與應(yīng)用。本發(fā)明通過提取荷瘤小鼠的腫瘤組織，并處理加工形成腫瘤細(xì)胞膜囊泡，經(jīng)化學(xué)修飾后形成可在腫瘤組織中原位形成凝膠的凝膠因子，在共載CDK5抑制劑和外泌體抑制劑后，可以有效的調(diào)控腫瘤細(xì)胞和腫瘤外泌體PD-L1，從而同時(shí)解除局部和系統(tǒng)性免疫抑制，因此具有良好的實(shí)際應(yīng)用之價(jià)值。

為實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明的第一個(gè)方面，提供CDK5抑制劑聯(lián)合外泌體抑制藥物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

所述CDK5抑制劑可以選自siRNA、shRNA、抗體、小分子化合物和肽段；

優(yōu)選地，所述CDK5抑制劑選自：Roscovitine(Rosco)，奧羅莫星(olomoucine)及其衍生物，Dinaciclib(MK-7965，SCH727965)，AT7519，CIP，p5和Cpd1等；

更優(yōu)選地，所述CDK5抑制劑為Roscovitine；

所述外泌體抑制藥物包括但不限于鈣離子離子通道抑制劑類、質(zhì)子泵抑制劑類、鞘磷脂-核糖核酸酶抑制劑類、內(nèi)皮素受體A干擾類藥物；

優(yōu)選地，所述外泌體抑制藥物可以選自：二甲基阿米洛利(DMA)、奧美拉唑、磺胺異惡唑、鞘磷脂酶抑制劑GW4869等；

更優(yōu)選地，所述外泌體抑制藥物為二甲基阿米洛利；

進(jìn)一步地，所述CDK5抑制劑為Roscovitine，外泌體抑制藥物為二甲基阿米洛利，二者質(zhì)量比為1～10：1；優(yōu)選地，二者質(zhì)量比為5：1。

所述抗腫瘤藥物至少具有如下一種或多種用途：

1)緩解腫瘤外泌體帶來的免疫抑制；

2)緩解腫瘤細(xì)胞表面PD-L1帶來的免疫抑制；