[發(fā)明專利]一種保肝和預(yù)防肝癌的刺嫩芽提取物及制備方法及分離檢測方法及組合物及應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110529010.4
• 申請日: 2021-05-14
• 公開（公告）號: CN113181226A
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王知斌;楊春娟;李凱;王知玉;鄒千
• 申請（專利權(quán)）人: 王知斌
• 主分類號: A61K36/25
• 分類號: A61K36/25;G01N30/02;G01N30/89;G01N21/31;A61P35/00;A61K127/00
• 代理公司: 哈爾濱市偉晨專利代理事務(wù)所(普通合伙) 23209
• 代理人: 曹徐婷

1.一種保肝和預(yù)防肝癌的刺嫩芽提取物，其特征在于：由刺嫩芽(遼東楤木嫩葉)單獨提取制得。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種保肝和預(yù)防肝癌的刺嫩芽提取物，其特征在于：所述的一種保肝和預(yù)防肝癌的刺嫩芽提取物包括齊墩果酸-3-O-α-L-阿拉伯糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、奧絲瓜苷A、齊墩果酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、楤木皂苷A、齊墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖]-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖苷、齊墩果酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖苷、常春藤皂苷元-3-O-β-吡喃葡萄糖苷、常春藤皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、常春藤皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)]-α-L-吡喃阿拉伯糖苷、刺囊酸-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷、楤木芽皂苷C、刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-O-α-L-阿拉伯吡喃糖苷、楤木芽皂苷A、楤木葉皂苷F、楤木葉皂苷G。

3.一種權(quán)利要求1-2所述的一種保肝和預(yù)防肝癌的刺嫩芽提取物的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：

步驟1、按照料液比為1：6～9g/mL刺嫩芽用乙醇溶液浸泡1～3h，然后加熱回流2～3次，每次2～3h，合并濾液，減壓回收乙醇，得到乙醇提取物；

步驟2、將步驟1得到的乙醇提取物用純凈水溶解后，經(jīng)AB-8大孔樹脂吸附，依次用水、30wt％乙醇、70wt％乙醇、90wt％乙醇洗脫，收集70wt％乙醇洗脫液，濃縮、干燥，得到保肝和預(yù)防肝癌的刺嫩芽提取物。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種保肝和預(yù)防肝癌的刺嫩芽提取物的制備方法，其特征在于：步驟1中乙醇溶液的濃度為65～75wt％；步驟2中乙醇提取物和純凈水的料液比為1：6～9g/mL，AB-8大孔樹脂柱的柱徑：柱高比為1:3，上樣流速為每小時1.0至1.5倍柱體積，上樣結(jié)束后依次用到6～8倍柱體積的水、5～7倍柱體積的30wt％濃度的乙醇、6～9倍柱體積的70wt％濃度的乙醇、4～7倍柱體積的90wt％濃度的乙醇進行洗脫，洗脫流速控制在每小時0.5～0.8倍柱體積。

5.一種權(quán)利要求1-2所述的一種保肝和預(yù)防肝癌的刺嫩芽提取物的分離檢測方法，其特征在于：將所述的一種保肝和預(yù)防肝癌的刺嫩芽提取物用純凈水溶解，再經(jīng)硅膠柱色譜、反相ODS柱色譜、制備型HPLC分離技術(shù)分離得到單體，然后用¹³C-NMR、¹H-NMR、MS中的一種或幾種波譜技術(shù)鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種保肝和預(yù)防肝癌的刺嫩芽提取物的分離檢測方法，其特征在于：所述的刺嫩芽提取物總皂苷的含量采用可見分光光度法法進行測定，對照品為齊墩果酸、楤木皂苷Ⅴ，所述的刺嫩芽提取物總皂苷的含量大于30％。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種保肝和預(yù)防肝癌的刺嫩芽提取物的分離檢測方法，其特征在于：刺嫩芽提取物的含量采用HPLC-ELSD法進行測定，其對照品為常春藤皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)]-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(1)、楤木皂苷A(2)、奧絲瓜苷A(3)、楤木芽皂苷C(4)、楤木芽皂苷A(5)、齊墩果酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖]-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、齊墩果酸3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)，色譜柱：迪馬鉆石C18(2)(4.6×250mm，5μm)；柱溫為30℃；以乙腈(A)-水(B)溶液為流動相，梯度洗脫(0～15min,10％→40％A；15～40min,40％A)，檢測器為蒸發(fā)光散射檢測器，載氣流速為3.2L/min，漂移管溫度為100℃，進樣量為10μL，流速為1.0mL/min。

8.一種權(quán)利要求1-2所述的一種保肝和預(yù)防肝癌的刺嫩芽提取物的應(yīng)用，其特征在于：用于預(yù)防肝癌的藥物，所述的用于預(yù)防肝癌的藥物為口服制劑。