[發明專利]一種能夠調節細胞生長狀態的細胞培養載體

有效

• 申請號: 202110515431.1
• 申請日: 2021-05-12
• 公開（公告）號: CN113184839B
• 公開（公告）日: 2022-11-15
• 發明（設計）人: 馬穎;李思儀;戢鴻澤;王健陽;王芊植
• 申請（專利權）人: 沈陽建筑大學
• 主分類號: C01B32/192
• 分類號: C01B32/192;C12N5/00;C12N5/077
• 代理公司: 沈陽東大知識產權代理有限公司 21109
• 代理人: 李珉

1.一種能夠調節細胞生長狀態的細胞培養載體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：

制備大尺寸氧化石墨烯分散液：按照Hummers法或改進Hummers法制備氧化石墨，在進行到雙氧水還原殘留氧化劑的步驟后，靜置取下層，分別用去離子水和稀HCl溶液洗滌后，透析至中性制得大尺寸氧化石墨烯分散液；

步驟2：

（1）調整大尺寸氧化石墨烯分散液的濃度，制備成氧化石墨烯墨水，將氧化石墨烯墨水打印在襯底上，冷凍后在冷凍干燥機中進行真空冷凍干燥6~10h，得到氧化石墨烯氣凝膠；所述氧化石墨烯墨水的濃度為6~36mg/L，真空冷凍干燥溫度為-45~-60℃；

（2）將氧化石墨烯氣凝膠進行化學還原，還原后取出自然冷卻，洗滌至中性，烘干后得到不同楊氏模量的石墨烯氣凝膠，附著了石墨烯氣凝膠的襯底為所制備的能夠調節細胞生長狀態的細胞培養載體。

2.根據權利要求1所述的能夠調節細胞生長狀態的細胞培養載體的制備方法，其特征在于，通過調節所述步驟2（1）中的氧化石墨烯墨水的濃度或/和真空冷凍干燥溫度，調整石墨烯氣凝膠的楊氏模量。

3.根據權利要求2所述的能夠調節細胞生長狀態的細胞培養載體的制備方法，其特征在于，所述將氧化石墨烯墨水打印在襯底上，是將氧化石墨烯墨水打印成設計好的特定形狀；制成的細胞培養載體中，所述特定形狀各部分的石墨烯氣凝膠楊氏模量相同或不同。

4.根據權利要求1所述的能夠調節細胞生長狀態的細胞培養載體的制備方法，其特征在于，所述襯底為等離子體親水處理過的PET膜、聚二甲基硅氧烷、玻璃或硅片。

5.根據權利要求1所述的能夠調節細胞生長狀態的細胞培養載體的制備方法，其特征在于，所述步驟2（2）中，化學還原過程為將氧化石墨烯氣凝膠浸入HI水溶液中，HI水溶液質量濃度為15%，加熱溫度為90~95℃，持續3~4h。

6.根據權利要求1所述的能夠調節細胞生長狀態的細胞培養載體的制備方法，其特征在于，所述氧化石墨烯墨水的濃度為12~30mg/L。

7.一種能夠調節細胞生長狀態的細胞培養載體，其特征在于，采用權利要求1至6中任一項所述的制備方法制備。

8.權利要求7所述的能夠調節細胞生長狀態的細胞培養載體的使用方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）從液氮中將凍存的細胞取出后，固定在 37℃水浴鍋內進行細胞復蘇；

（2）在細胞完全融化前取出，加入細胞培養液離心后，取底部細胞沉積物，搖勻后加入細胞培養液移入培養瓶中，放置入細胞培養箱中進行培養；

（3）將培養液和培養好的細胞移入裝有所述能夠調節細胞生長狀態的細胞培養載體的細胞培養皿中，使細胞在培養載體上生長。

9.根據權利要求8所述的能夠調節細胞生長狀態的細胞培養載體的使用方法，其特征在于，所述細胞為L929細胞、A7r5細胞、LS8細胞的一種或幾種。