[發明專利]一種硼砂硼酸緩沖液及其在電泳中的應用

在審

• 申請號: 202110503957.8
• 申請日: 2021-05-09
• 公開（公告）號: CN113176324A
• 公開（公告）日: 2021-07-27
• 發明（設計）人: 潘澤民;李冬妹;潘璐彤;王露月;鄭志紅;者湘漪;張金莉;王慧娟;付少偉;王芳;張春賀;高蕊;李洪濤;龍海晨
• 申請（專利權）人: 石河子大學
• 主分類號: G01N27/447
• 分類號: G01N27/447
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 22100
• 代理人: 魏征驥

本發明涉及一種硼砂硼酸緩沖液及其在電泳中的應用，屬于生物技術領域。硼砂硼酸緩沖液的pH＝8.6，離子強度為0.05、0.06或0.075，所述硼砂硼酸緩沖液在電泳中的應用。優點是硼砂硼酸緩沖液使用硼砂和硼酸兩種化學藥品進行配制，這兩種化學藥品容易購買，價格便宜。緩沖液的pH容易調整，離子強度容易進行計算，適合開展血清醋酸纖維薄膜電泳和血清脂蛋白電泳實驗，另外，硼砂硼酸緩沖液根據需要還可以使用在其它不同pH及不同離子強度的生命科學實驗研究中。使用硼砂硼酸緩沖液效果非常好，血清醋酸纖維薄膜電泳區分出正確的蛋白質條帶，而血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳也區分出脂蛋白條帶，條帶清晰，明確和完整，為正常開展實驗研究和實驗教學提供了支持。

技術領域

本發明屬于屬于生物技術領域，用于電泳的緩沖液，尤其涉及硼砂硼酸緩沖液及其在血清醋酸纖維薄膜和脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳中的應用。

背景技術

血清醋酸纖維薄膜電泳使用pH為8.6，離子強度為0.06的巴比妥鈉/巴比妥緩沖液，血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳所用pH為8.6，離子強度分別為0.05和0.075巴比妥鈉/巴比妥緩沖液。血清醋酸纖維薄膜電泳實驗在醫學院生物化學實驗教學中非常重要，可以將血漿蛋白分為：清蛋白、α₁球蛋白、α₂球蛋白、β球蛋白和γ球蛋白；學生可以掌握電泳技術的原理，電泳必須具備的條件和影響電泳的因素等方面的知識。另外，對于掌握血清蛋白的分類和含量有重要的意義，有助于學生理解清蛋白與球蛋白比例倒置在肝硬化的診斷中的作用(正常人清蛋白/球蛋白＝1.5-2.5：1；而肝硬化清蛋白/球蛋白＝0.5：1)。血清瓊脂糖凝膠電泳實驗可以讓學生掌握血清脂蛋白的分類、組成和功能，對于學生掌握血清脂蛋白代謝有十分重要的意義。多年來，這兩個實驗都使用巴比妥鈉/巴比妥緩沖液，巴比妥鈉為短時巴比妥類催眠藥，對中樞的抑制作用隨劑量增加可以達到鎮靜催眠的作用。巴比妥曾作為催眠藥或鎮靜藥應用于臨床，但因作用弱、不良反應多、不安全、易成依賴性而被淘汰。由于巴比妥鈉和巴比妥是麻醉藥品和精神藥品類，不能繼續再使用。若沒有相應的pH和離子強度的緩沖液代替，這兩個實驗將不能給學生再開設，學生將失去這兩個驗證理論知識的生物化學實驗。因此找到巴比妥鈉/巴比妥緩沖液的替代緩沖液就顯得十分重要。

發明內容

本發明提供一種硼砂硼酸緩沖液及其在電泳中的應用，目的是使用硼砂、硼酸建立合適的pH及離子強度用于替代巴比妥鈉/巴比妥緩沖液，使用在血清醋酸纖維薄膜和血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳中。

本發明采取的技術方案是：

一種硼砂硼酸緩沖液的pH＝8.6，離子強度為0.05、0.06或0.075。

一種硼砂硼酸緩沖液的配制方法，配制pH＝8.6，離子強度為0.06的硼砂硼酸緩沖液步驟是：取硼砂7.63克，硼酸3.30克，加蒸餾水溶解，終體積到1升。

一種硼砂硼酸緩沖液的配制方法，配制pH＝8.6，離子強度為0.05的硼砂硼酸緩沖液步驟是：取硼砂6.36克，硼酸2.75克，加蒸餾水溶解，終體積到1升。

一種硼砂硼酸緩沖液的配制方法，配制pH＝8.6，離子強度為0.075的硼砂硼酸緩沖液步驟是：取硼砂9.536克，硼酸4.123克，加蒸餾水溶解，終體積到1升。

本發明所述硼砂硼酸緩沖液在電泳中的應用。

本發明將醋酸纖維薄膜浸泡到pH＝8.6，離子強度為0.06的硼砂硼酸緩沖液中10-20分鐘。

本發明使用pH＝8.6，離子強度為0.05硼砂硼酸緩沖液配制0.035％瓊脂糖凝膠步驟是：稱取瓊脂糖0.035g，加入該硼砂硼酸緩沖液100ml，置微波爐中溶解，分裝于三角燒瓶中，冰箱保存。

本發明使用pH＝8.6，離子強度為0.075硼砂硼酸緩沖液作為血清瓊脂糖凝膠電泳槽內的緩沖液。