[發明專利]一種重組融合蛋白及其在結核診斷中應用在審
| 申請號： | 202110492645.1 | 申請日： | 2021-05-06 |
| 公開（公告）號： | CN113045677A | 公開（公告）日： | 2021-06-29 |
| 發明（設計）人： | 高正倫;趙愛華;陳凱;都偉欣;劉華山;盧錦標;王丹萌;龐陵麗;張晨陽;王寧;魯歡;武迎華;閆明捷;孟繁爽;田家倫 | 申請（專利權）人： | 北京祥瑞生物制品有限公司 |
| 主分類號： | C07K19/00 | 分類號： | C07K19/00;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/18;C12N15/62;C12N15/70;G01N33/569 |
| 代理公司： | 南京天華專利代理有限責任公司 32218 | 代理人： | 杜靜;徐冬濤 |
| 地址： | 101407 北京市*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 重組 融合 蛋白 及其 結核 診斷 應用 | ||
1.一種重組融合蛋白，其特征在于，將來自于結核分枝桿菌的Esat-6和CFP-10兩種多肽串聯融合，具體是串聯2條Esat-6肽鏈和1條CFP-10肽鏈。
2.根據權利要求1所述的重組融合蛋白，其特征在于，多肽串聯融合方式為Esat6-Esat6-CFP10。
3.根據權利要求2所述的重組融合蛋白，其特征在于，所述的重組融合蛋白，多肽相連接時均刪除接頭的甲硫氨酸(M)直接銜接，共刪除兩個M，多肽之間沒有連接子。
4.根據權利要求1所述的重組融合蛋白，其特征在于，所述的重組融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
5.根據權利要求1所述的重組融合蛋白，其特征在于，所述的重組融合蛋白兩端不添加標簽或僅添加His標簽。
6.編碼權利要求1所述重組融合蛋白的核苷酸。
7.根據權利要求6所述的核苷酸，所述核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
8.權利要求1所述重組融合蛋白在制備結核診斷試劑或檢測試劑盒中的應用。
9.權利要求1所述重組融合蛋白的制備方法，其特征在于，將權利要求1所述重組融合蛋白的編碼基因序列插入原核表達載體，轉入菌株擴增和純化。
10.根據權利要求9所述的制備方法，其特征在于，所述純化方法為：用(15～25)％和(35～45)％飽和度的硫酸銨使蛋白梯度沉淀，隨后進行超濾，將蛋白溶液體系更換為pH＝7.8～8.2的Tris-尿素；超濾結束后進行陰離子層析，7％～9％的NaCl去除雜蛋白，11％～13％的NaCl收集目的蛋白。
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