[發明專利]一種頜骨或骨干發育不良小鼠模型的構建方法有效
| 申請號: | 202110459500.1 | 申請日: | 2021-04-27 |
| 公開(公告)號: | CN113249406B | 公開(公告)日: | 2022-08-09 |
| 發明(設計)人: | 胡穎;李鴻宇;王小予;董蕊 | 申請(專利權)人: | 首都醫科大學附屬北京口腔醫院 |
| 主分類號: | C12N15/85 | 分類號: | C12N15/85;A01K67/027;C12N15/11;C12Q1/6888 |
| 代理公司: | 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 | 代理人: | 錢云 |
| 地址: | 100050*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 頜骨 骨干 發育 不良 小鼠 模型 構建 方法 | ||
1.一種頜骨或骨干發育不良小鼠模型的構建方法,其特征在于,包括:
將小鼠基因組中Ano5基因第360位氨基酸由半胱氨酸突變為酪氨酸。
2.根據權利要求1所述的構建方法,其特征在于,包括:基于CRISPR/Cas9方法,通過打靶載體將小鼠基因組中Ano5基因第360位氨基酸由半胱氨酸突變為酪氨酸。
3.根據權利要求2所述的構建方法,其特征在于,所述打靶載體包括如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
4.根據權利要求2所述的構建方法,其特征在于,包括:
構建所述打靶載體,并轉染ES細胞;
將sgRNA和Cas9核酸酶的mRNA經體外轉錄后,和打靶載體陽性的ES細胞一起置于小鼠囊胚中。
5.根據權利要求4所述的構建方法,其特征在于,所述sgRNA為如SEQ ID NO:2和SEQ IDNO:3所示的核苷酸序列。
6.根據權利要求1-5任一項所述的構建方法,其特征在于,所述小鼠為野生型小鼠。
7.打靶載體或包括所述打靶載體的試劑盒在構建頜骨或骨干發育不良小鼠模型中的應用;
所述打靶載體包括如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
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