[發明專利]一種犬用犬血清去蛋白眼睛凝膠及其制備方法

在審

• 申請號: 202110455633.1
• 申請日: 2021-04-26
• 公開（公告）號: CN112957374A
• 公開（公告）日: 2021-06-15
• 發明（設計）人: 紀志輝;石文達;王金明;劉峰達;劉方;竇月霞;蘇煜智;趙彥智;劉繼紅;王宏偉
• 申請（專利權）人: 泰州博萊得利生物科技有限公司
• 主分類號: A61K35/16
• 分類號: A61K35/16;A61K9/06;A61K47/38;A61P27/02
• 代理公司: 北京市誠輝律師事務所 11430
• 代理人: 岳東升;楊帥峰

本發明提供一種犬用犬血清去蛋白眼睛凝膠及其制備方法，所述犬血清去蛋白提取物的提取方法，簡單有效，可以克服牛血清提取物中存在很多牛源的蛋白、多糖、糖肽等成分的缺陷，同時不需要添加任何外源的化學試劑或者其他成分，因此不含有外源的蛋白或者雜質，而且可以有效的去除內毒素對患寵的影響，提高患寵的接受性，增強治療效果。本發明提供的犬用眼用凝膠是專門針對患犬使用的眼用凝膠，由于其主要成分為犬血清去蛋白提取物，因此不會產生排斥性或者其他的過敏反應，提高治療效果。

技術領域

本發明生物醫藥技術領域，具體地說，涉及一種犬用犬血清去蛋白眼睛凝膠及其制備方法。

背景技術

DECB眼用凝膠最先由瑞士Solco制藥研發生產，商品名素高捷療(solcoseryl)，于歐洲市場率先上市。素高捷療眼膏是一種凝膠狀的滴眼液，呈透明狀，適用于眼干燥癥及結膜、角膜潰瘍或損傷。該滴眼凝膠是由小牛血提取物、凝膠基質及防腐劑組成。小牛血提取物含有小分子肽、氨基酸和無機鹽。該眼藥能促進眼部創傷愈合，對中輕度眼干燥癥患者，能起到潤濕、潤滑和營養的作用。

素高捷療眼用凝膠自80年代進入我國，在臨床上廣泛應用。寵物眼科疾病近年激增，臨床眼用制劑銷量一直占據寵物用藥前幾位，需求很大，我國尚無寵物廠家生產此類眼膏，并且受歐洲瘋牛病的影響，此類產品進口困難，價格昂貴。現在常見的生產眼用凝膠的主要原料為小牛血去蛋白提取物。小牛血去蛋白提取物，是一種從小牛血中分離提取得到的小分子生物活性物質，具有組織細胞修復及增殖作用，可廣泛用于各種原因造成的皮膚、角膜潰瘍、褥瘡、燒傷、皮膚移植、傷口糜爛的愈合。但是由于牛血清提取物中存在很多牛源的蛋白、多糖、糖肽等成分，在具體寵物的應用時，會造成寵物的過敏反應，嚴重的甚至會造成休克或者死亡，嚴重影響了上述藥物在寵物治療中的應用。而且由于牛可能攜帶瘋牛病、口蹄疫等多種病毒，會給后續的寵物治療帶來臨床應用的安全隱患。

此外，現有技術中利用牛或者胎牛血液制備去蛋白提取物的方法雖然很多，但是并不適宜于寵物的治療過程中，而且現有的小牛血去蛋白提取物中間體的生產方法基本都為化學提取法，在提取過程中或多或少的都會引入外源的蛋白或者雜質，這會更加劇寵物治療過程中的排斥和抵觸。此外，在后續的純化步驟中主要為離心、乙醇除蛋白、酸解酶解除蛋白、超濾除大分子物質等過程。但目前公知技術中很難最大程度的去除蛋白和保留活性物質，會造成產品質量不穩定，批次之間差距較大，影響產品的療效，難以形成模范化的治療標準。

在中國專利CN200910246717.3公開的一種小牛血去蛋白提取物組合物注射液及其制備方法，在制備過程中需要加入枸櫞酸鈉、胃蛋白酶酶解、枯草桿菌蛋白酶、乙醇、木糖醇和ε-聚賴氨酸。這樣的方法不僅復雜，而且需要加入大量的化學物質，從而破壞了小牛血去蛋白提取物的純凈性。

在中國專利CN200410013643中使小牛血去蛋白提取物溶液中的氨基酸、小肽可聚合成大分子量的肽及高分子肽，使藥品產生抗原性并降低了藥品的生物活性，引起臨床過敏反應增加。這種方法制備的產品并不能用在目的是降低過敏反應的寵物治療領域，而且雖然其技術難度小，易于生產，但很難將雜質，特別是蛋白完全去除，影響了產品純度，從而危害患者健康甚至生命。

在中國專利CN200610080520中公開了另一種小牛血去蛋白提取技術，利用真空旋轉蒸發儀減壓除乙醇、酶水解、離心、葡聚糖G15凝膠層析脫鹽和DEAE-Sephadex-50凝膠層析分離，最后膜濾除并紫外線滅菌。該方法所用酶水解除蛋白條件劇烈，破壞了更多的活性物質，使得產品生物活性降低，難以實現較好的治療效果。

因此，本領域亟需一種利用簡單、便捷的方法利用寵物動物的血液制備寵物動物來源的血清去蛋白提取物來代替昂貴的、含有外源雜質的牛血清，從而獲得適合中國國情的寵物眼用凝膠，使之廣泛的應用在寵物的治療過程中。

發明內容

本發明的目的是提供一種提取犬血清去蛋白提取物的方法。

所述方法具體為：