[發明專利]一種血清二氧化碳測定試劑球的制備方法及試劑球

在審

• 申請號: 202110454996.3
• 申請日: 2021-04-26
• 公開（公告）號: CN113278680A
• 公開（公告）日: 2021-08-20
• 發明（設計）人: 牟健;汪晨宇;周慧欣;陳明
• 申請（專利權）人: 深圳市錦瑞生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/527
• 分類號: C12Q1/527;C12Q1/32
• 代理公司: 深圳市六加知識產權代理有限公司 44372
• 代理人: 孟麗平

1.一種血清二氧化碳測定試劑球的制備方法，其特征在于，包括：

將緩沖液、磷酸烯醇式丙酮酸、還原型輔酶Ⅰ、蘋果酸脫氫酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、鎂鹽、穩定劑、賦形劑和水混合形成混合液，并調整所述混合液的PH值至預設值；

將所述混合液的液滴滴在液氮中，以使所述液滴形成冰球；

將所述冰球進行冷凍干燥制得所述血清二氧化碳測定試劑球；

其中，所述混合液包括以下組分：緩沖液5-150mmol/L，磷酸烯醇式丙酮酸5-20g/L，還原型輔酶Ⅰ：0.1-10g/L，蘋果酸脫氫酶5-20KU/L，磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶0.1-5KU/L，穩定劑0.1-10g/L，賦形劑10-100g/L，其中，所述穩定劑用于維持所述磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶和所述蘋果酸脫氫酶的活性，所述穩定劑為蛋白類或二糖類穩定劑。

2.根據權利要求1所述的血清二氧化碳測定試劑球的制備方法，其特征在于，所述將緩沖液、磷酸烯醇式丙酮酸、還原型輔酶Ⅰ、蘋果酸脫氫酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、鎂鹽、穩定劑、賦形劑和水混合形成混合液，并調整所述混合液的PH值至預設值，包括：

將所述緩沖液加入第一預設定量的水中；

待所述緩沖液在所述水中完全溶解后，依次加入穩定劑、賦形劑和鎂鹽，得到第一溶液，并調節所述第一溶液的PH值至所述預設值，其中，所述預設值的范圍為7.5-9.0；

將所述磷酸烯醇式丙酮酸、所述還原型輔酶Ⅰ、所述蘋果酸脫氫酶和所述磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶依次加入所述第一溶液中，并將第二預設定量的水加入所述第一溶液中，得到第三預設定量的所述混合液。

3.根據權利要求1或2所述的血清二氧化碳測定試劑球的制備方法，其特征在于，所述賦形劑包括海藻糖、甘露醇、肌醇、水溶性淀粉、葡聚糖1萬、葡聚糖4萬中的至少一種。

4.根據權利要求1或2所述的血清二氧化碳測定試劑球的制備方法，其特征在于，所述穩定劑包括絲氨酸、甘氨酸、蔗糖、牛血清白蛋白、乙二胺四乙酸中的至少一種。

5.根據權利要求1或2所述的血清二氧化碳測定試劑球的制備方法，其特征在于，所述緩沖液包括Tris緩沖液、甘氨酸-氫氧化鈉緩沖液、HEPES緩沖液中的至少一種。

6.根據權利要求1或2所述的血清二氧化碳測定試劑球的制備方法，其特征在于，所述鎂鹽包括硫酸鎂或乙酸鎂。

7.根據權利要求1或2所述的血清二氧化碳測定試劑球的制備方法，其特征在于，所述冰球的體積為2.5ul-3.5ul。

8.一種試劑球，其特征在于，采用如權利要求1-7任意一項所述的血清二氧化碳測定試劑球的制備方法制備得到。

9.一種微流控芯片，其特征在于，包括芯片本體和如權利要求8所述的試劑球，其中，所述試劑球設置于所述芯片本體內部。

10.一種生化分析儀，其特征在于，包括分析儀本體、反應槽以及如權利要求9所述的微流控芯片，其中，所述反應槽開設于所述分析儀本體內，所述微流控芯片安裝于所述反應槽。