[發(fā)明專利]一種用于腫瘤診療一體化的納米復合藥物及其制備方法

有效

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• 申請日: 2021-04-25
• 公開（公告）號: CN113384694B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發(fā)明（設計）人: 張曉茹;劉博;裴玉嬌;何鵬;宋維玲
• 申請（專利權）人: 青島科技大學
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;A61K41/00;A61K31/704;A61K47/54;A61P35/00;B82Y5/00;B82Y40/00
• 代理公司: 青島高曉專利事務所(普通合伙) 37104
• 代理人: 付麗麗

1.一種用于腫瘤診療一體化的納米復合藥物的制備方法，具體包括以下步驟：

（1）合成雙面神結構探針Au-I：

采用現有技術合成50 nm的金納米粒子，通過將氨基涂覆的載玻片浸入AuNPs溶液中過夜，將AuNPs吸附到載玻片上；然后將載玻片浸入一端修飾巰基，一端修飾環(huán)炔的巰基聚乙二醇二苯并環(huán)辛炔SH-PEG-DBCO中2小時，再超聲處理2分鐘，超聲后分散在pH7.4，0.01％吐溫的磷酸鹽緩沖液中；

將帶疊氮基修飾具有靶向功能DNA與其互補鏈按1：1.2混合并在95℃下退火5分鐘，形成具有靶向和載藥功能的DNA雙鏈；

通過點擊反應與超聲處理使具有靶向和載藥功能的DNA雙鏈與一面修飾SH-PEG-DBCO的AuNPs相連；

再利用Au-S鍵將TCEP處理后的巰基ATP適體DNA連接在AuNP上，在12小時內向所得溶液中緩慢添加NaCl進行老化，8000r離心5分鐘去除過量的DNA，得到一面具有靶向和載藥功能DNA，一面ATP適體DNA的雙面神結構探針，將其分散在pH 7.4的三乙酸鹽緩沖液中保存待用，

（2）加載藥物

加載化療藥物DOX制備Au-I-DOX，將化療藥物DOX與制備的雙面神結構探針Au-I混合三小時以上，反應結束后通過在8000r離心5分鐘從溶液中去除過量的藥物并分散在三羥甲基氨基甲烷緩沖液中，得到Au-I-DOX，

加載化療藥物DOX和光動力藥物TMPyP4制備Au-I-D/T，將TMPyP4與Au-I-DOX探針混合通過在7500 rpm下離心5分鐘除去游離的TMPyP4，得到Au-I-D/T，

將探針分子5,5'-二硫代雙-（2-硝基苯甲酸）DTNB與制備的雙面神結構探針Au-I一起孵育過夜，

所述帶疊氮基修飾具有靶向功能DNA 序列為N3-GGC GGA GCC CTA ACC CTA ACC CTAACC CTG GTG GTG GTG GTT GTG GTG GTG GTG G-3’；帶疊氮基修飾具有靶向功能DNA互補鏈序列為 TAGGGCTCCGCC-3’；ATP適體DNA由SH-TTTTTTTTTACCTGGGGGAGTAT和SH-TTTTTTTTTTGCGGAGGAAGGT組成。